蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB )实验

western blot 是半定量研究蛋白质表达的基础实验，常应用于对生物体内信号通路、代谢途径的研究，对其中起到关键作用的蛋白进行研究，用于蛋白的定性和定量研究。

western blot 操作关键步骤

1.组织采集或细胞培养

2.样品制备

3.SDS-PAGE

4.转膜

5.一抗的孵育

6.二抗的孵育

7.显影

Western blot实验样品要求：

1.新鲜或正确保存的组织、细胞或蛋白样品。

2.组织样品：每份样品约250~500mg;

3.细胞样品：每份样品约1×106~1×107 细胞数;

4.蛋白样品：裂解样品总蛋白量>500μg/样品，浓度≥2μg/μl。

冷冻样品应保存于-80℃，最好使用干冰运输到达实验室。

Western blot实验报告呈现：

1.样品处理流程;

2.实验操作步骤;

3.原始WB图片;

4.软件Image J初步分析灰度值表;

5.如有需要提供柱状图