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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC972H
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
MNNG/HOS; MNNG-HOS; HOS-MNNG; HOS/MNNG; MNNGHOS; MNNG-HOS (Cl#5); MNNG/HOS Clone F-5; MNNG; R-1059-D; TE85; Te85; TE-85; HOS-TE85; Hos TE-85; HOS TE 85; HOS TE85; HOS (TE85); HOS(TE85); HOS (TE85, Clone F5); MNNG-HOS (TE 85, clone F-5); TE-85 clone F-5; HOS-Te85; TE 85.T; TE 85 ClF-5; HOS-TE85 clone 5; TE-85 clone 5 |
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组织来源 |
骨 |
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疾病 |
骨肉瘤 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代，消化2-3秒 |
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完全培养基配置 |
MEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 |
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简介 |
MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]细胞是HOS经0.01mcg/ml MNNG(一种致癌的亚硝胺)转化而来。MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]细胞饱和浓度高，在软琼脂中的克隆形成率高，并能在裸鼠中成瘤。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
每周 2 至 3 次 |
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STR |
Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 12 D16S539: 10,13 D5S818: 13 D7S820: 11,12 THO1: 6 TPOX: 8,11 vWA: 18 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号SH-H040 |
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保藏机构 |
ATCC; CRL-1547 |
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产品使用 |
仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验min。注：平末端连接效率较低，在连接体系中添加 PEG4000 可以提高连接效率。在连接体系中添加 EcoRV 酶可以显著提高阳性率。四、 转化大肠杆菌感受态细胞及通过载体上的引物进行 PCR 鉴定阳性克隆挑选阳性克隆进行测序验证, 验证正确后, 提取质粒进行转染试验, 关于 sgRNA 是否有效。可以转染之后，直接提取 DNA，通过测序验证，如果在靶标位点附近开始出现杂乱的多峰说明是 sgRNA 有效，如果没有则该 sgRNA 无效。
宿主菌的裂解，故称为噬菌体。噬菌体主要有双链噬菌体和单链丝状噬菌体两大类，双链噬菌体为λ类噬菌体，单链丝状噬菌体有M13、f1、fd噬菌体。 再聊聊噬菌体展示技术 噬菌体技术两大核心——建库和筛选 01噬菌体建库 从B淋巴细胞中扩增抗体的H链和L链基因文库，抗体片段群与噬菌体衣壳蛋白融合表达并展示于噬菌体表面，形成噬菌体展示抗体库。主要有三种类型： scFv库（由VH和VL组成，并由一个小肽（Gly4Ser）3连接成一个单链多肽）、Fab库（含有VH-CH，VL-CL
准备工作： 细菌培养：小量提取质粒DNA 鉴定正确后，将菌液以1/50~1/20体积的比例接种到250ml液体培养基中，37℃振荡培养过夜至对数生长晚期。注：培养体积与最终质粒DNA 的收获量并无线性关系。只要培养条件适宜，50ml的培养液有时也可得到总量高达1mg以上的质粒。操作步骤 ： 1、细菌的收获：将菌液倒入合适的离心管中，8000g离心5分钟，弃上清，并在吸水纸上倒置离心管使上清全部流尽。2、将细菌沉淀重悬于10ml溶液Ｉ中。溶液Ｉ：50mmol/L葡萄糖，25mmol/LTris
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