- ￥1000
- SHBio
- 进口
- SHC3869
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | h22/luc |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2197 |
| 中文名称： | 小鼠肝癌细胞H22标记luciferase |
| 规格： | T25 |
| 组织来源： | 肝 |
| 生长特性： | 悬浮生长 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | 1640+10%FBS |
| 传代方法： | 1:2传代 |
| 冻存条件： | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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文献和实验动物活体光学成像（Optical in vivo Imaging），指利用光学的探测手段结合光学探测分子对实验动物进行成像，来获得动物体内生物学信息的方法。根据探测方式的不同，光学成像可分为生物发光成像、荧光成像、上转换荧光成像、切伦科夫成像和 X-ray 成像等。其中，最常用到的是生物发光成像和荧光成像。生物发光是用荧光素酶（Luciferase）基因标记细胞或 DNA，而荧光技术则采用荧光报告基团（GFP、RFP、Cyt 及 dyes 等）进行标记。 动物活体光学成像通过将目的基因、细胞
内，大多数细胞器内及细胞质的pH值都在 7.0 左右，然而溶酶体内的 pH 值就比较低，mCherry 的 PK 值比较低，可以用于标记溶酶体内的蛋白。 光稳定性：荧光蛋白被不断激发的过程中，会逐渐失去发光能力。对于高质量成像、荧光信号定量分析以及详细描述生物模型，需要选择光稳定性好的荧光蛋白。在普通荧光成像中，例如激光共聚焦对光稳定性要求不是很高，而超分辨荧光成像对光稳定性要求比较高。 成熟时间：指荧光蛋白翻译后正确折叠并形成发光结构所需的时间。成熟时间较长的荧光蛋白不适合标记短寿命的蛋白，目的
使用的好处。 图10 未标记外泌体和 NIR 标记外泌体的原子力显微镜图片 Chem Commun (Camb). 2018 Jun 26;54(52):7219-7222. 五、用 Gaussia luciferase（gluc）和截断的 lactadherin 标记： 将 gLuc-lactadherin 构成融合表达的质粒，再将此质粒转染细胞，使细胞分泌的外泌体带有强的萤光素酶活性。将标记的外泌体进行静脉注射入小鼠体内，看外泌体在组织的分布情况。 图11 将表达
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