luciferase（荧光素酶）标记稳定细胞系构建

简介

动物活体内光学成像（optical in vivo imaging）是基于分子影像学孕育而生的，主要采用生物发光（bioluminescence）与化学荧光（fluorescence）两种技术在活体动物体内进行生物标记，通过成像系统来观测活体动物体内肿瘤的生长及转移，感染性疾病的发展进程、特定基因的表达等生物学过程。

荧光素酶的发光是生物发光，不需要激发光，但需要底物荧光素。荧光素酶在氧气、ATP存在的条件下，给予外源（腹腔或静脉注射）底物荧光素（luciferin），即可在几分钟内发生氧化反应，生成氧化荧光素(oxyluciferin)，并产生发光现象。此发光现象只有在活细胞内才会产生，并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。在动物体内，光在传播时会被散射和吸收，可见光主要是被血红蛋白吸收，主要吸收的是可见光蓝绿波段；但在大于600 nm的红光波段，血红蛋白的吸收作用比较小，也就是说，大量的光虽然有部分散射但可以透过组织和皮肤而被高灵敏CCD检测到。通过选用适当的CCD镜头、成像暗箱，可由仪器量化检测到光强度，同时反映出细胞的数量。

该项技术操作方便，测量迅速，图像清晰，信噪比低，价格便宜，可精确定量，易于被大多数研究员接受，在动物体内研究方面得到广泛应用。

特点

将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒或病毒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素（通常以荧光素酶钾盐或钠盐的形式），通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

• 优点：特异性强，灵敏度高，且无自发荧光；能够进行精确定量

• 缺点：信号较弱，检测时间较长；需要高度灵敏的仪器设备；需要底物

服务流程

优势

吉满生物自研多种的荧光素酶（Luciferase, Luc）标记细胞，涵盖常用的细胞类型，每株细胞都经STR或物种检测、荧光素酶功能验证。吉满生物提供的Luciferase稳转细胞株采用慢病毒法构建，除稳定高效地表达荧光素酶外，还具有发光强度高、体内成瘤与成像效果好等优点，可满足活体动物成像和体外分析等多方面的应用需求。