- ¥5000 - 8000
- 筛选得到可稳定表达目的蛋白；筛选得到稳定沉默特定基因的细胞株。
- 不限
- 2026年01月01日
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- 服务名称：
稳定细胞株构建
- 提供商：
广州伯信生物科技有限公司
建立稳定细胞株，一种方法是根据基因载体的抗性标志选用筛选药物。最常用的抗性标记基因有潮霉素(hygromycin)、新霉素(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin)；另一种方法是荧光筛选，通过克隆化的方式来筛选。
目前构建稳定细胞株常用慢病毒方法：利用慢病毒整合到宿主基因组的特性来筛选稳定株（可以在短时间内获得高效率的稳定细胞株）。
客户提供
① 待稳定转染细胞株；
② 稳转质粒（可由伯信提供服务）；
③ 慢病毒（可由伯信提供服务）；
伯信提供
① 稳定转染细胞株，≥5×106细胞；
② 目的基因稳定表达或沉默载体构建报告（实验仪器、试剂、方法、结果、结论）；
③ 目的基因稳定表达或沉默效率验证报告（实验仪器、试剂、方法、结果、结论）。
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文献和实验w_dennis 请教各位高人前辈，有做过基因的部分核苷酸缺失后，回补株构建实验吗？如何操作？ 请教下pBAD/gⅢ和pBR322质粒构建回补株的原理？叩谢！！:) woxingwosu 看看这个有没有帮助了： http://journal.shouxi.net/qikan/article.php?id=534304 w_dennis 谢谢，请问有pBAD/gⅢ和pBR
用慢病毒筛选稳定细胞株，以G418筛选方法为例，筛选出稳定整合Neomycin抗性基因的细胞系。 A 、 G418 抗生素最优浓度筛选 每种细胞对抗生素的敏感性不同，因此，准备建立稳定细胞系之前，需要确定能够在10-14天杀死细胞的最佳浓度。 方法如下 ： 1、将细胞稀释到1000个细胞/mL，接种到24孔板，每孔1ml。 2、接种后第二天在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选。3、每隔3天跟换1次培养液，保持G418浓度不变。 4、选择出
1. 2 稳定转染细胞株的构建 原理： 稳定转染，就是转染的质粒DNA 整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可 长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。 应用： 观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（稳定，可长期进行研究） 一般流程：
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