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过表达稳定细胞系构建
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吉满/Genomeditech
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服务简介
构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418来代替新霉素进行选择性筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。
慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达,因此,慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。
吉满生物制备的带puromycin抗性的慢病毒,在感染目的细胞后,可通过加入puromycin进行选择性筛选,从而获得稳定表达shRNA或者特定基因的细胞株。推荐使用1. 构建细胞模型,用于后续基因功能研究和基因治疗研究等;2. 适用于体内实验,用于裸鼠成瘤;3. 用于药物靶筛选、细胞信号传导通路分析及蛋白质相互作用等。服务流程
其他相关服务
1. 过表达慢病毒构建与包装;2. 慢病毒包装/扩增;3. miRNA慢病毒。
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