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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量现货
- 保质期:
六个月
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100ml
产品简介:
破膜液用于染色或免疫组化前对细胞膜的处理。破膜液可以使完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。本公司生产的破膜液主要成分为Triton X-100。
保存条件:
4℃保存,有效期6个月。
使用方法:
将切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液覆盖组织,常温下孵育20-30min,然后将玻片置于PBS(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。即可进行下一步骤。
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文献和实验棕色小玻璃瓶,标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
能和 FcγR Ⅲ/Ⅱ结合,封闭非特异性染色,使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入 0.5-1μg 纯的抗小鼠 CD16/32 单克隆抗体,室温孵育 10min。 对于人和大鼠,可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型的纯化 Ig 或者与目标种属相同来源血清进行阻断,或者用商业化的 Fc 受体阻断剂。 五、细胞表面抗体孵育 根据实验设计,除空白对照外,对应的单染管、全染管加入相应的抗体 5μL,混匀,4℃ 避光孵育 30min。 六、固定破膜 按照说明书稀释固定破膜液。 每管加入
。 1.2 取100 μL细胞/管(约1 × 106细胞),分别加到做好标记的EP管底部。 固定 2.1 如需要表面染色,则先依照“细胞表面染色步骤”选用适宜抗体进行表面染色。 2.2 用1×细胞固定/破膜液(Fixation/Permeabilization buffer),将流式管中的细胞重悬,室温避光孵育30分钟。 2.3 300g离心5分钟,弃去上清。 破膜 3.1 用1×细胞破膜buffer(Permeabilization Buffer)将固定过的细胞悬起,300g离心5分钟
样品制备Sample Type外周血单个核细胞Species人Age of specimen样本染色后 1 h 之内完成上机检测Prep Method1. 取 200 ul 全血加 200 ul1640,并加入适量 PMA 等试剂,刺激 4 h;2. 混匀后去 100 ul 刺激后的标本并加入相应膜抗,室温避光孵育 20 min;3. 加固定液,孵育后离心去上清;4. 加入适量生理盐水,1500 rpm 转速下离心 5 min 去除上清液;5. 加破膜液混匀,并加入相应胞浆抗体适量,混匀后室温避光
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