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- 库存:
大量现货
- 保质期:
三个月
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
10ml
产品简介:
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。本试剂蛋白酶K的浓度是200µg/ml,可按实验要求适当稀释后用。
保存条件:
4℃保存,有效期3个月。
使用方法:
可与本公司TUNEL试剂盒配套使用:
使用前用PBS(pH7.4)10倍稀释,配制成蛋白酶K工作液。取一定量的工作液覆盖组织,37℃孵育10-30min。然后将玻片置于PBS(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
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文献和实验棕色小玻璃瓶,标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
与所有的化学平衡一样,当溶液的浓度、温度等条件改变时,弱酸、弱碱的解离平衡会发生移动。就浓度的改变来说,除用稀释的方法外,还可在弱酸、弱碱溶液中加入具有相同离子的强电解质以改变某一离子的浓度,从而引起弱酸或弱碱解离平衡的移动。例如,往 HAc 溶液中加入 NaAc ,由于 Ac - 离子浓度增大,使平衡向生成 HAc 的一方移动,结果就降低了 HAc 的解离度。又如,往 NH 3 水溶液中加入 NH 4 Cl ,由于 弱酸溶液中加入该酸的共轭
中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50―100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。 推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。 值得注意的是,蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交
蛋白酶 K,威力巨大的广谱蛋白酶,95C 加热10 分钟,则完全失活。数年前首次使用它,是替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头,效果不错;后来又用于处理 RNase-Free的水,效果也是一级棒。从此就再也不用 DEPC 了。现在将它的细节公开,与大家分享。 配制 RNA 裂解试剂时,直接用灭菌的双蒸水配制,最后,加入蛋白酶 K 至终浓度 1ug/ml。轻轻混匀,室温放置 15 分钟后即可。枪头及离心管去除 RNase:先将枪头及离心管清洗干净后,移入预先混好的含 1ug
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