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microRNA原位杂交
microRNA原位杂交
RNA原位核酸杂交(RNA nucleic acid hybridization in situ)又称RNA原位杂交(RNA in situ hybridization RISH)。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。其基本原理是：在细胞或组织结构保持不变的条件下，用标记的已知的RNA核苷酸片段，按核酸杂交中碱基配对原则，与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交)，所形成的杂交体(Hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的RNA分子。现在探针标记技术有生物素、DIG、碱性磷酸酶、辣根过氧化酶和荧光素。
microRNA原位杂交实验流程:
- 组织预处理：冰冻切片、石蜡切片、细胞爬片等样本取材、固定、切片。
- 脱蜡：石蜡切片在乙醇、甲醛中脱蜡。
- 蛋白k孵育
- 原位杂交
- 杂交后处理
- 杂交后显色
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文献和实验myskite 同一张组织切片能同时做microRNA 原位杂交和某基因的原位杂交以及免疫组化吗？ zhujoker 不行，一般使用连续切片来达到你的这种研究目的。 myskite 哦，谢谢 myskite microRNA探针用生物素标记还是荧光标记，还要做某基因的免疫组化 myskite 做microRNA的原位杂交
MicroRNA和siRNA克隆的实验方法(protocol)
MicroRNA and siRNA Cloning Protocol (UPDATED July 2005)[MIT] Bartel Lab, MIT this is a protocol about MicroRNA and siRNA Cloning Protocol collect from internet: 下载protocol: http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013
近两年microRNA的研究受到越来越多科学家的关注，大量的实验结果揭示了microRNA在胚胎发育、癌症等方面起到非常重要的调控作用，据推测microRNA可能调控至少30%的基因的表达情况。 如果您也想开展microRNA的研究，该如何下手了？首先你需要知道在你感兴趣的研究领域里到底有哪些miRNA是活跃分子，幸运的话通过阅读发表的文章就能锁定一些miRNA分子，否则需要做一个miRNA表达谱芯片分析来初筛出有研究价值的那些miRNA。表达谱芯片的原理简单的说就是把待测样品中的miRNA
