临床方案设计指导

CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导

的原件与表达 Cas9 的原件相连接，得到可以同时表达两者的质粒，将其转染细胞，便能够对目的基因进行基因操作，在 PAM (5'-NGG) 上游～3bp 进行切割，如下图所示。因此本实验的关键步骤是设计一对 20bp（不包括 NGG 在内的）完全互补的 oligo 插入到如上图所示的 filler。另 U6 启动子需要 5' 端的 G 起始转录，因此若设计的 oligo 第一个碱基非 G，需额外增加一个 G。操作详细流程1. 设计 sgRNA关于 sgRNA 的设计我们有专门开过一篇文章《一文掌握

【建议】oligo 和premier 两款引物设计软件使用指导

面对如此功能强大的两个引物设计软件，不知如何使用确实难事！ Oligo使用方法介绍 作为目前最好、最专业的引物设计软件，Oligo的功能很强，在这里我们介绍它的一些主要功能：如：普通引物对的搜索、测序引物的设计、杂交探针的设计以及评估引物对质量等等。 在正式进行引物设计前，我们首先面临的一个任务就是向Oligo程序导入模板序列，根据不同的实验情况，导入模板有三种方法： 1， 直接用键盘输入： a， 点击file菜单中的New Sequence 浮动命令，或直接点击工具

图像发表时显微镜信息标注的注意事项

采集所用的成像软件 环境条件或处理，如培养或气体控制   鸣谢机构工作人员或纳入作者署名： 大多数情况下，一个研究项目从构思到发表需要多人参与。对实验设计的开发有贡献，为研究者定制了分析工具，以供研究中使用的情况，则应考虑将他们加入您的作者名单。成像机构和其他显微镜专家可以为您提供帮助，甚至指导实验者如何注明信息，帮助提供任何仪器资助方面的信息，并就其首选的信息标注方法为实验者提供指导。