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研载生物
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meRIP实验
RNA甲基化免疫共沉淀技术(MeRIP)
甲基化RNA免疫共沉淀 (methylated RNA Immunoprecipitation,meRIP)基于特异性抗体特异性结合甲基化修饰的碱基的原理,以RNA免疫共沉淀富集甲基化修饰片段为基础,然后通过高通量测序,在全转录组范围内研究发生甲基化的RNA区域,获得结果。目前己被成功的用于检测全基因组的RNA甲基化的修饰。其主要的实验原理为,利用免疫共沉淀的方法即用抗RNA甲基化抗体与被随机打断的RNA片段进行孵育,pulldown得到有RNA甲基化修饰的片段,并用于后续核酸检测。
一、技术简介
RNA甲基化免疫共沉淀(Methylated RNA immunoprecipitation,MeRIP)是研究RNA甲基化修饰的实验技术。其实验原理为使用抗甲基化抗体(如anti-m6A)特异识别目标甲基化修饰模式,形成抗体-RNA复合物,通过与免疫共沉淀相似的方法,使用琼脂糖微珠或磁珠捕获并富集具有目标甲基化修饰的RNA片段,纯化后利用qPCR或高通量测序分析所得的RNA序列。
二、实验流程
1.细胞裂解与RNA提取
2.RNA质检与定量
3.RNA片段化
4.免疫沉淀
5.收集与RNA重抽提
6.分析检测
三、服务说明
1.目标RNA位点信息
2.细胞样本,细胞量不低于3×10^7个细胞;
3.组织样本不低于1g
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文献和实验[1]Wang F, Yang C, Zheng F, Yan Y, Li G, Feng Y, Xu H, He Z, Cai D, Sun H, Qi X, Mao Y. METTL1 mediates PKM m7G modification to regulate CD155 expression and promote immune evasion in colorectal cancer. J Transl Med. 2024 Dec 31;22(1):1161. doi: 10.1186/s12967-024-05991-1. PMID: 39741310; PMCID: PMC11686999.
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