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研载生物
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meRIP实验
RNA甲基化免疫共沉淀技术(MeRIP)
甲基化RNA免疫共沉淀 (methylated RNA Immunoprecipitation,meRIP)基于特异性抗体特异性结合甲基化修饰的碱基的原理,以RNA免疫共沉淀富集甲基化修饰片段为基础,然后通过高通量测序,在全转录组范围内研究发生甲基化的RNA区域,获得结果。目前己被成功的用于检测全基因组的RNA甲基化的修饰。其主要的实验原理为,利用免疫共沉淀的方法即用抗RNA甲基化抗体与被随机打断的RNA片段进行孵育,pulldown得到有RNA甲基化修饰的片段,并用于后续核酸检测。
一、技术简介
RNA甲基化免疫共沉淀(Methylated RNA immunoprecipitation,MeRIP)是研究RNA甲基化修饰的实验技术。其实验原理为使用抗甲基化抗体(如anti-m6A)特异识别目标甲基化修饰模式,形成抗体-RNA复合物,通过与免疫共沉淀相似的方法,使用琼脂糖微珠或磁珠捕获并富集具有目标甲基化修饰的RNA片段,纯化后利用qPCR或高通量测序分析所得的RNA序列。
二、实验流程
1.细胞裂解与RNA提取
2.RNA质检与定量
3.RNA片段化
4.免疫沉淀
5.收集与RNA重抽提
6.分析检测
三、服务说明
1.目标RNA位点信息
2.细胞样本,细胞量不低于3×10^7个细胞;
3.组织样本不低于1g
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