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外泌体标记荧光染料/细胞膜荧光
探针DiOC16(3)22042
研卉生物
Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1)
大量
低温
25mg
为您提供优质的细胞膜荧光探针DiOC16(3),高氯酸盐。
| Di系列染料 | 特点 | 选择建议 |
| DiO染料（绿色） | 活细胞或固定细胞、组织的的长期示踪剂。荧光强度低于DiI。对某些固定组织的染色效果一般。 | DiI, DiO, DiD 和 DiR均可染色活细胞或固定细胞及组织（请您根据您的需求选择相应的探针），DiI比DiO荧光更亮；DiD，DiR波长更长，更适合组织染色； |
| DiA染料（绿色） | 一种细胞膜绿色荧光染料，它在细胞膜中的扩散速度比 DiO 快，并且经常和 DiI 一起使用于细胞膜双色标记。可以进行染色后的固定。DiA 对固定细胞的染色效果比 DiO 好。 | |
| DiI染料（橙色） | 活细胞或固定细胞、组织的的长期示踪剂。除标记细胞膜外，还可以检测细胞的融合和粘附、细胞迁移等。 | |
| DiB染料（橘色） | 一种检测细胞膜电位的亲脂性阴离子荧光染料，它本身无荧光，当进人细胞与胞浆内的蛋白质结合后才发出荧光。当它进入细胞后，指示细胞内荧光强度增加，即膜电位增加表示细胞去极化；反之，若细胞内荧光强度降低，即膜电位降低表示细胞超极化。 | |
| DiD染料（红色） | 染色效率高，均一，不易猝灭，细胞毒性低，背景干扰小。 | |
| DiS染料（红色） | 一种细胞膜红色荧光染料，它在细胞膜中的扩散速度比 DiD快，可以进行染色后的固定。DiS 对固定细胞的染色效果比 DiD好。 | |
| DiR染料（深红色） | 常用于标记细胞膜，红外荧光可以穿透细胞和组织，在活体成像中用来示踪。DiR可以进行染色后的固定。 |
操作方法
1.准备DiO，DiI，DiD，DiS或DiR膜染色溶液：
1.1制备DMSO或EtOH储备溶液：储备溶液应在DMSO或EtOH中以1-5mM制备。
注意：储备溶液的未使用部分应储存在-20 ℃。 避免反复冻/融循环。
1.2准备工作溶液：将储备溶液（步骤1.1）稀释到合适的缓冲液中，如无血清培养基，HBSS或PBS制备1至5μM的工作溶液。
注意：对于不同的细胞类型和/或实验条件，应根据经验确定工作溶液的浓度。 建议在至少超过十倍范围的浓度下进行测试。
2.将细胞染成悬浮液：
2.1在染料工作溶液中悬浮细胞密度为1×106 / mL（来自步骤1.2）。
2.2在37°C孵育2-20分钟。 孵育时间取决于细胞类型。 首先孵育20分钟，然后根据需要进行优化以获得均匀的标记。
2.3将标记的悬浮管以1000至1500rpm离心5分钟。
2.4取出上清液，轻轻地将细胞重新悬浮在预热（37°C）的生长培养基中。
2.5按步骤2.3和2.4洗涤两次。
3.染色贴壁细胞：
3.1在无菌玻璃盖玻片上培养贴壁细胞。
3.2从生长培养基中取出盖玻片，轻轻地排出多余的培养基。 将盖玻片放在湿度箱中。
3.3将100μL染料工作溶液（来自步骤1.2）吸移到盖玻片的角落，轻轻搅拌直至所有细胞都被覆盖。
3.4将盖玻片在37°C孵育2-20分钟。 孵育时间取决于细胞类型。 首先孵育20分钟，然后根据需要进行优化以获得均匀的标记。
3.5排出染料工作溶液，用生长培养基清洗盖玻片2-3次。每个洗涤循环用预热的生长培养基覆盖细胞，孵育5-10分钟后排出培养基。
4.显微镜检测：
4.1说明书中的表1总结了DiD，DiO，DiI，DiS和DiR滤波器组的选择。
4.2为了同时检测多种染料，可提供如下多波段滤波器组：
a）DiI和DiO = Omega XF52，Chroma 51004
b）DiI和DiD = Omega XF92，Chroma 51007
c）DiI，DiO和DiD = Omega XF93，Chroma 61005
5.流式细胞仪检测：
用DiO，DiI，DiD，DiS和DiR标记的细胞可分别使用常规FL1，FL2，FL3和FL4流式细胞仪检测通道进行分析。
您可以使用以下任何一种亲脂性荧光染料标记膜和其他疏水结构，例如外泌体：
DiO（绿色荧光），DiI（橙色荧光），DiD（红色荧光）和DiR（深红色荧光）的独特荧光颜色为多色成像和流式细胞仪分析提供了方便的工具。
参考文献
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