- ￥1997
- AAT Bioquest
- 1275
- 美国
- 2025年07月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- CAS号：
1275
- 保质期：
ReadiLink™ Rapid XFD488 Antibody Labeling Kit *XFD488 Same Structure to Alexa Fluor™ 488*
- 英文名：
ReadiLink™ Rapid XFD488 Antibody Labeling Kit *XFD488 Same Structure to Alexa Fluor™ 488*
- 供应商：
ReadiLink™AF488抗体快速标记试剂盒
- 保存条件：
-20℃
- 库存：
ReadiLink™AF488抗体快速标记试剂盒
- 规格：
2x50 ug Labelings
货号：1275
规格：2x50 ug Labelings
| Ex (nm) | 490 | Em (nm) | 520 |
| 分子量 | - | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Readilink™蛋白标记技术是制备用于荧光成像和流式细胞仪应用的荧光抗体缀合物的强大，方便的工具之一。ReadiLink™AF488抗体快速标记试剂盒为制造AlexaFluor®488标记的抗体缀合物提供了便捷的工具（AlexaFluor®是ThermoFisher Scientific的商标）。此ReadiLink™试剂盒中使用的AF488染料相当稳定，并且对蛋白质氨基具有良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2x50 ug抗体的所有基本组分。试剂盒中提供的两个AF488染料小瓶中的每一个均经过优化，可标记约50 µg抗体。制备的AF488缀合物（与试剂盒一起使用）无需进一步纯化即可直接用于荧光成像和流式细胞术。它提供了制备AF488标记抗体的便捷方法。
样品分析方案
工作溶液配制
注意：如果蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意：要标记100 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将10 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2-7.4；如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，则必须使用1X PBS（pH 7.2-7.4）进行透析，或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜（密理博公司的产品目录UFC501008）去除游离的胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注意：抗体的纯度非常重要。
注意：为获得标记效率，建议终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。
重要：在打开之前，将所有组分加热并短暂离心小瓶，并在开始缀合之前立即准备所需的溶液。以下方案仅供参考。
操作步骤
- 将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一个小瓶标记染料（AF488-组分A）中，并通过将小瓶涡旋几秒钟将其充分混合。
注意：如果要标记100 µg的蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质，并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶，用于下一步。 - 将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。
- 将5 µL（对于50 µg蛋白质）或10 µL（对于100 µg蛋白质）添加到结合反应混合物中，占TQ™染色猝灭缓冲液（组分C）总反应体积的10％；混合均匀。
- 在室温下孵育10分钟。标记的蛋白（抗体）现在可以使用了。
图1.分别用和不用小鼠抗微管蛋白染色的HeLa细胞，然后用ReadiLink™Rapid AF488抗体标记试剂盒（Cat＃1275）制备的Alpha Fluor™488山羊抗小鼠IgG结合物的免疫荧光分析。
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| 1292 | ReadiLink Cy5抗体标记试剂盒（标记50ug抗体） | 2 Labelings | 2111 |
| 1294 | ReadiLink Cy7抗体标记试剂盒（标记50ug抗体） | 2 Labelings | 2111 |
| 1299 | ReadiLink FITC抗体标记试剂盒（标记50ug抗体） | 2 Labelings | 2111 |
| 5518 | Buccutite 聚HRP抗体偶联试剂盒 | 1x50 ug Labeling | 5237 |
| 5519 | Buccutite 聚HRP抗体偶联试剂盒 | 2x50 ug Labelings | 6559 |
| 1325 | Buccutite PerCP抗体标记试剂盒 标记100ug抗体 | 2 Labelings | 7092 |
| 1353 | Buccutite PerCP抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 | 2 Labelings | 4245 |
| 1275 | ReadiLink™AF488抗体快速标记试剂盒 | 2x50 ug Labelings | 1997 |
| 1276 | ReadiLink™AF555抗体快速标记试剂盒 | 2x50 ug Labelings | 1997 |
| 1277 | ReadiLink™AF594抗体快速标记试剂盒 | 2x50 ug Labelings | 1997 |
| 1278 | ReadiLink™AF647抗体快速标记试剂盒 | 2x50 ug Labelings | 1997 |
| 1279 | ReadiLink™AF750抗体快速标记试剂盒 | 2x50 ug Labelings | 1997 |
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文献和实验参考文献
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SE 活性部分远低于50%（AlexaFluor488微量标记试剂盒产品信息，Invitrogen）。相反，所有Biotium 的CF染料具有相对稳定的胺活性的SE基团型，这比大部分AlexaFluor 染料的SE更耐水解。总体来说，CF染料SE产品一贯的给出更高的标记效率，提供给用户更好的使用价值。选择方案：蓝色（350-450nm处激发） CF 350、Alexa Fluor 350、AMCA等----亮蓝和紫外光激发CF350是类似于Alexa Fluor 350和传统荧光染料AMCA的蓝色
了 BMMSCs 中确实发生了硫巯基化。 为了定量描述硫巯基化程度，作者还同时使用化学发光法进行了 western blot，检测出靶蛋白的总量作为 Input，对数据进行归一化（normalization）处理，结果如下： 图 2. 用马来酰亚胺分析 BMMSCs 中 TRPV3 和 TRPM4 钙通道的巯基化作用。NaHS- 和 DTT 处理的 BMMSCs 中，TRPV3 蛋白的绿色荧光降低。 实验原理巧妙，但操作步骤只需要在传统的 IP-WB 基础上稍作调整： 1. 荧光标记：AF488-C5
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