DiD即DiIC18(5),也称为DiD' solid,全称为1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindodicarbocyanine,4-Chlorobenzenesulfonate Salt,是一种远红外细胞膜荧光探针(Far-red Plasma Membrane Fluorescent Probe)。
DiD是DiI的类似物,但具有更长的激发和发射波长,为远红外荧光,在一些细胞和组织染色中更有优势,特别适合用于进行多种荧光的同时染色。
DiD是一种亲脂性羰花青(carbocyanine)染料,具有很长的亲脂性烃链,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色,染色后非常稳定。
DiD可被633nm的氦-氖(He-Ne)激光所激发,DiD在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiD被激发后可以发出远红外的荧光,DiD的分子结构式及和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考图1。其中,最大激发波长为644nm,最大发射波长为665nm。
图1. DiD的分子结构式(A)以及和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱(B)。
DiD的分子式为C67H103ClN2O3S,分子量为1052.08。
DiD可以溶解于无水乙醇、DMSO和DMF,其中在DMSO中溶解度大于5mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
DiD被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。DiD通常不会明显影响细胞的生存力(viability)。
DiD除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
用于细胞膜荧光标记时,DiD的常用浓度为1-30µM,最常用的浓度为5-10µM。DiD可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚`甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
DiD染色后可以兼容免疫荧光实验。建议使用碧云天的免疫染色通透液(Saponin) (P0095)或使用洋地黄皂苷(ST1272)配制的不会溶解细胞膜的通透液进行通透,其它去垢剂配制的通透液可能会溶解细胞膜上的脂类物质,造成DiD失去结合位置,最终导致DiD的染色失效。但通透也可能会影响DiD在细胞膜上的定位并会增加细胞内的染色,具体实验中需根据实验的需求选择合适的细胞通透液。
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
C1039-10mg |
DiD (细胞膜远红外荧光探针) |
10mg |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
4℃避光保存,一年有效。配制的储存液-20℃避光保存,半年有效。
注意事项:
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。