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高纯度血清/血浆外泌体抽提试剂盒

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  • ¥3408
  • 翌圣生物(Yeasen)已认证
  • 41216ES20
  • 上海
  • 2025年10月16日
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    • 英文名

      Hieff® high purity exosome isolation kit(for Serum/Plasma)

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • 保存条件

      -20度

    • 规格

      20T

    产品描述
    Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构,存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。该血清/血浆外泌体快速提取纯化试剂盒,组分经过优化处理,适用于血清/血浆中的外泌体提取,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒。本试剂盒采用独特的分离技术,可以快速从血清/血浆中获得大量完整的外泌体颗粒,适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量(qPCR)和高通量测序等应用。

    产品组分 产品细节图片1
    编号 组分 规格
    41216-A Solution P1(-25~-15℃保存) 20mL
    41216-B Solution P2(室温保存) 5mL
    41216-C Exosome Purification Column(室温保存) 20个
     
    运输和保存方法
    收到产品后将试剂分开储存,使用前请充分混匀。
    Solution P1:室温运输,打开试剂盒后储存于-25~-15℃条件下(常规冰箱冷冻层);
    Solution P2:室温保存;
    Exosome Purification Column:室温保存。 
     
    注意事项1、使用前请将外泌体抽提试剂(41216-A)充分混匀。
    2、产品只针对血清/血浆样本,不适用其它体液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提;如果需要进行细胞上清外泌体分离,
    请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。
    3、如果想要进一步纯化外泌体,可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。
    4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    5、本产品仅作科研用途!
     
     
    操作方法
    一、样品预处理:
    1、离心机在使用前先于 4℃预冷 10 min;
    2、取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 2-8℃条件下进行解冻待完全融化后置于冰上待用;如果是新鲜样品,置于冰上待用;
    3、将样品按照 500 μL /管进行分装,不足部分用 1×PBS补足至500μL(单管处理体积)。
    二、去除杂蛋白
    1、取出Solution P1 放冰箱预冷10min ,置于冰上预冷;
    2、在 500 μL 血液样品中 加入400μL 预冷的 Solution P1,立即将离心管盖紧,通过涡旋振荡器充分混匀 30s;
    3、将混匀后的样品于 4℃以 12000 rpm 离心 20 min,杂蛋白沉淀后,取上清液转移至新的1.5mL离心管中;
    三、外泌体提取
    1、在上清液中加入 120 μL 的 Solution P2,离心管盖紧,通过涡旋振荡器充分混匀 2 min;再放置于室温下静置 5 min;
    2、将装有混合液的离心管于 4℃以 12000 rpm 离心 15 min,弃上清;
    3、重复步骤2(注:尽可能吸净上清液),并将 1.5 mL 离心管于室温下敞口静置 10 min;
    4、取 200 μL 的 1×PBS 均匀吹打离心沉淀物,待其溶解后,将重悬液转移至新的 1.5 mL 离心管中;
    5、将含有重悬液的 1.5 mL离心管于 4℃以 12000 rpm 离心 5 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒;(注:此时可能有较多沉淀,为正常现象)
    四、纯化外泌体
    1、将收获的外泌体颗粒粗品转入 Exosome Purification Column(纯化柱)上室中,于 4℃以 5600 rpm 离心 20 min,离心后收集纯化柱管底的液体,此液体即为纯化后的外泌体颗粒;(注:纯化柱不可重复使用)。
    2、纯化后的外泌体以50-100 μL 进行分装保存于-80℃低温冰箱中,以备后继实验使用。
    五、外泌体除菌(可选):
    获得的外泌体后期需要与细胞共培养,可以使用0.22 μm的滤器进行过滤除菌。初次尝试时,外泌体浓度在10-100 μg/mL内做梯度摸索,选择一个较为合适的条件。
    HB230210
     

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    • 外泌体抽提、鉴定及蛋白质组学的样本量要求

      注:如同时要求外泌体抽提、鉴定及蛋白质组学,请将样本要求量进行加和。 备注:请明确提供的样本体积。细胞上清及尿液,超过 50ml,每 50mL 算作一个 1 个样本,以此计算样本数,核算抽提周期。血清血浆、关节液、脑脊液进行超速离心,每 5mL 算作 1 个样本,以此计算样本数,核算抽提周期。

    • 干货:外泌体研究实操中的常见问题解答

      沉淀。 5、开封后的 ECS 试剂有沉淀出现是否可以继续使用? 答:沉淀物如果是结晶状,建议 56 度水浴摇晃混匀。如果结晶消失,则可以继续使用,少量沉淀不影响提取效果。 6、乳液提取试剂盒加 solution B 之后无豆花状固体,此时是否可以继续实验? 答:不可以,必须在明确看到豆花状沉淀,溶液变透明后才可进行下一步操作。此时需要继续加入适量 solution B,并在 37 度水浴加热,直至看到豆花状沉淀。 7、如何选择血清血浆样本来进行外泌体研究? 答:血清血浆都是常见的外泌体样本

    • 如何用外泌体「套路」申请关于国自然?

      我们选取几种常见的样本分别介绍样本处理的要求: 细胞培养上清:选用这种样本的优势是不会受到样本量的限制,但是需要注意以下几点:一是一定不能添加含有外泌体的 FBS;二是细胞一般培养 24-48h 后即可分离外泌体;三是注意细胞不允许有污染、细胞死亡率要控制在 5% 之内。 血清/血浆:选用血液作为样本时,要注意血清血浆的区别。血清是血液凝固之后收集的液体,如果研究与血小板相关的疾病,选用血清作为样本比较合适;血浆是血液去除了血细胞之后得到的液体,一般情况下选择血浆更合适。尽量在采血 30min

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