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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20度
- 保质期:
一年
- 英文名:
TRITC Phalloidin
- 库存:
充足
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
300T(40734ES75)/1mg(40734ES80)
| 规格: | 300T(40734ES75) | 产品价格: | ¥1075.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1mg(40734ES80) | 产品价格: | ¥6456.0 |
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态 平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1 µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还 可抑制 F-actin 的 ATP 水解活性。

本品为 TRITC标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比 Actin 抗体更好的染 色效果,适合用作 F-actin 的定性和定量检测。另外,经本品结合后的 F-actin 仍能维持 actin 自身具有的许多生物学特性。 且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。
我司分别提供冻干粉形式(货号:40734ES80)和储存液形式(货号:40734ES75,浓度为 20 µM)的 TRITC 标记鬼笔 环肽,用户根据自身需求选择。建议使用浓度为 80~200 nM。
产品性质
| 分子式(Molecular Formula) | C60H70N12O13S2 |
| 分子量(Molecular Weight) | 1231.4 |
| 最大激发/发射波长(Ex/Em) | 540~546/565~575 nm |
| 多肽序列(Sequence) | TRITC-bicyclic(Ala-DThr-Cys-cis-4-hydroxy-Pro-Ala-2-mercapto-Trp-4-hydroxy-5-amino-L eu)(S-3 to 6) |
| 外观(Appearance) | 紫色粉末(冻干粉) |
| 溶解性(Solubility) | 溶于 DMSO、DMF、甲醇等 |
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃避光干燥保存, 1年有效。
注意事项
1) 鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量 LD50 约 2 mg/kg)。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3) 本产品仅作科研用途!
1) (可选)甲醇
2) 1×PBS 缓冲液, pH 7.4, 细胞培养级别(货号:41403ES76)
3) 固定液 4%多聚甲-醛(溶于 PBS 缓冲液)(货号:60536ES60)
4) 丙-酮或透化液 0.5% Triton X-100(溶于 PBS 缓冲液)
5) Fluoromount-GTM 水溶性封片剂(不含 DAPI)(货号:36307ES08),DAPI(货号:40727ES10)
6) (可选)DAPI Fluoromount-GTM 水溶性封片剂(含 DAPI)(货号:36308ES11)
7) (可选)BSA,标准级别(货号:36101ES25)
8) 载玻片和盖玻片
9) 盖玻片周围密封液(如透明指甲油)
10)组装有 TRITC 激发/发射滤片,以及 DAPI 激发/发射滤片的荧光显微镜或共聚焦显微镜。
操作步骤
1.工作液准备
1)对于 TRITC 标记鬼笔环肽(货号:40734ES75,300 T)
本品以溶于甲醇的 20 µM 储存液形式提供,总量为 300 µL。按照 100 nM 的工作液浓度来换算,可制备总量为 60 mL 的工 作液。建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,-20℃避光冻存,一年稳定。
开始实验前,使用 1×PBS 缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200 nM。工作液现配现用。
2)对于 TRITC 标记鬼笔环肽(货号:40734ES80,1 mg)
本品以冻干粉形式提供,分子量为 1231.4,总量为 1 mg。可先用甲醇或者 DMSO 充分溶解配制成 20~100 µM 的储存液。 如,加入 8.1208 mL 甲醇到 1 mg 鬼笔环肽即得到 100 µM 等量的储存液,根据单次使用量,进行小量分装,-20℃避光冻 存,一年稳定。
开始实验前,使用 1×PBS 缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200 nM。工作液现配现用。
2.染色步骤
1)细胞爬片生长 24 h,使其密度达到 50%汇合度。
2)吸掉培养液,37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3)使用溶于 PBS 的 4%甲-醛溶液进行细胞固定,室温固定 10 min。
【注】避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4)室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10 min。
5)室温条件下,用丙-酮(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5 min。
6)室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10 min。
7)取 200 µL 配制好的 TRITC 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育 30 min(通常情况下,4℃~37℃ 孵育皆可)。
【注】为了降低背景,可于 TRITC 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥发,可 将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8)用 PBS 清洗盖玻片 3 次,每次 5 min。
9)使用 200 µL DAPI 溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约 30 s。
10)用 PBS 清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封 片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存,通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。
【注】也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂(货号:36308ES11)合并步骤 9)10),简化步骤。
11)荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择 TRITC 激发/发射滤片(Ex/Em=545/570 nm)和 DAPI 激发/发射滤 片(Ex/Em=364/454 nm)。
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文献和实验[1] Wang D, Yin Y, Wang S, et al. FGF1ΔHBS prevents diabetic cardiomyopathy by maintaining mitochondrial homeostasis and reducing oxidative stress via AMPK/Nur77 suppression. Signal Transduct Target Ther. 2021;6(1):133. Published 2021 Mar 24. doi:10.1038/s41392-021-00542-2(IF:18.187)
[2] Li J, Niu J, Min W, et al. B7-1 mediates podocyte injury and glomerulosclerosis through communication with Hsp90ab1-LRP5-β-catenin pathway [published online ahead of print, 2022 Jun 16]. Cell Death Differ. 2022;10.1038/s41418-022-01026-8. doi:10.1038/s41418-022-01026-8(IF:15.828)
[3] Fu J, Zhu W, Liu X, et al. Self-activating anti-infection implant. Nat Commun. 2021;12(1):6907. Published 2021 Nov 25. doi:10.1038/s41467-021-27217-4(IF:14.919)
[4] Xie M, Shi Y, Zhang C, et al. In situ 3D bioprinting with bioconcrete bioink. Nat Commun. 2022;13(1):3597. Published 2022 Jun 23. doi:10.1038/s41467-022-30997-y(IF:14.919)
[5] Chen Q, Yu S, Zhang D, et al. Impact of Antifouling PEG Layer on the Performance of Functional Peptides in Regulating Cell Behaviors. J Am Chem Soc. 2019;141(42):16772-16780. doi:10.1021/jacs.9b07105(IF:14.695)











