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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20 ℃保存,有效期24个月。
- 保质期:
24个月
- 英文名:
Taq DNA Polymerase
- 库存:
现货
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- CAS号:
-
- 规格:
1000U
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产品描述: 产品名称:重组高热稳定DNA 聚合酶 描述: 本品是 94 kDa 的耐热性 DNA 聚 合 酶, 通 过 将 Thermus aquaticus DNA Polymerase 的基因经克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离提取而得到的,与天然 Taq DNA 聚合酶具有相同的功能。具有 5' → 3' 聚合酶活性和 5' → 3' 外切酶活性,但无 3' → 5' 外切酶活性。PCR 产物的 3' 端带 A,可克隆至 T 载体。
技术指标: 质量控制: 使用方法: 1、 建议的 qPCR 反应体系:
2、常规 PCR 反应程序:
注 : 如果使用酵母菌液作为 PCR 扩增模板,建议目的片段长度不超过 2.5 kb,若超出 2.5 kb, 建议将酵母菌液预先进行破壁处理。 储存/保存方法: -20 ℃保存,有效期24个月。
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文献和实验在体外将两个或多个来源相同或不相同的 DNA 片段连接成新的重组 DNA 分子,再转到特定宿主细胞中进行自主复制并表达。这是分子生物学中的基本技术。DNA 重组技术的基本程序包括:(1)获得外源 DNA:外源 DNA 是进行 DNA 重组的目的 DNA 片段,一般采用 DNA 聚合酶链式反应 (PCR) 或逆转录-DNA 聚合酶链式反应 (RT-PCR)、基因组文库或 cDNA 文库筛选等方法获得。(2)载体的构建或选择:分子生物学中用的载体是指能在特定宿主细胞中自主复制的 DNA 分子
枪法(Biolistic-bombardment)(植物细胞) Transfer of T-DNA from Agrobacterium into a plant cell Regeneration of leaf disks infected by Agrobacterium DNA重组 外源基因插入与否可通过载体上的Lac Z基因进行初步的筛选。有外源基因插入的细菌呈白斑,无外源基因插入的细菌呈蓝斑
1实验原理 DNA重组分子在体外构建完成后,必须导入特定的受体细胞,使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状,这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。对于不同的受体细胞,往往采取不同的转化战略。1.1 DNA重组分子的常用转化方法 1.1.1 Ca 2 诱导转化1970年Mandel和Higa发现用CaCl2处理过的大肠杆菌能够吸收l噬菌体DNA,此后不久,Cohen等人用此法实现了质粒DNA转化大肠杆菌的感受态细胞,其整个操作程序为:1)将处于对数生长期的细菌置入0℃
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