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Human Complemen
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碧云天的Human Complement Factor D ELISA Kit (Human Complement Factor D Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人补体因子D酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Complement Factor D的ELISA试剂盒。本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为29g/ml,与人的Coagulation Factor (凝结因子) II、Coagulation Factor X、Coagulation Factor XI及小鼠和大鼠的D因子等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。补体系统大约由30种游离血浆蛋白和相应的细胞表面受体组成,是免疫系统中的重要组成部分,参与病原体的清除过程。补体因子D (Complement Factor D),又称Adipsin,是一种丝氨酸蛋白酶,属于补体系统活化过程中不可缺少的部分。人补体因子D首先合成253个氨基酸的前体蛋白,在生理条件下,成熟的D因子以无活性酶的形式存在,需要与其天然底物C3b-结合因子B结合,从而激活其催化活性。成熟的人D因子与黑猩猩、猕猴、猪和小鼠D因子分别具有98%、96%、84%和66%的氨基酸同源性。补体因子D在多种细胞和组织中都有所表达,例如单核细胞/巨噬细胞、肌肉组织、坐骨神经、子宫内膜、肾脏、小肠和脂肪细胞等。肥胖小鼠模型中D因子水平通常会出现减少。血浆中补体因子D的水平受到肾脏的代谢调节,通过肾小球滤过和肾小管重吸收调节体内D因子水平。在肾功能衰竭的患者体内,游离补体因子D的水平会有所升高。补体因子D缺陷会导致补体系统活性降低,补体因子D基因缺陷的患者体内会出现补体因子D不足,从而导致复发性的细菌感染发生。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人Complement Factor D的浓度,其原理见图1。人Complement Factor D特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人Complement Factor D会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人Complement Factor D抗体后,生物素化抗人Complement Factor D抗体与人Complement Factor D结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人Complement Factor D浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中人Complement Factor D浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。包装清单:
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