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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
ABTS法含量测试盒
- 库存:
174
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100T/96S

注 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
研究意义:
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理:
ABTS 法是使用广泛的间接检测方法,可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTS经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基 ABTS+,能溶于水相或酸性乙醇介质中,在 734nm 处有大吸收。被测物质加入 ABTS+溶液后,所含抗氧化成分能与 ABTS+发生反应而使反应体系褪色。在 734nm 检测吸光度的变化,并以 Trolox 作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。
自备实验用品:
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体 120mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 24mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:粉剂×2 瓶,4℃避光保存。
样品的制备:
(1)血清、血浆、唾液或尿液等液体样品血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 离心10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过30d)后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
(3) 细胞样品
按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
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文献和实验。 ④体内核心生物标志物清单 抗氧化酶:SOD、CAT、GPx、GR、GST; 非酶抗氧化:GSH、维生素C/E、尿酸; 氧化损伤标志物:MDA(脂质)、8-OHdG(DNA)、蛋白羰基、F2-异前列腺素(体内脂质过氧化金标准); 总抗氧化能力:TAC、ORAC当量。 5.领域共识与核心挑战 方法学共识:不存在“金标准”单一检测,必须多方法、多层次联合验证; 转化瓶颈:体外化学活性强的物质,体内往往效果不佳,核心原因是生物利用度低、代谢快、体内氧化网络复杂; 行业痛点:方法标准化不足,实验
的核苷酸。这一标记密度最利于半抗原与碱性磷酸酶标记的抗地高辛精之间的反应。因为一个标记抗体大约复盖20个核苷酸。Boehringer Mannheim公司生产的地高辛精DNA标记试剂盒和地高辛检测试剂盒在分子杂交中的应用愈来愈广泛。现介绍地高辛标记cDNA探针随机引物延伸法。1.、将DNA(1μg~3μg)加热95℃(或100℃) 10min,随即在冰/NaCl中骤冷。DNA充分变性对探针标记十分重要。5μl对照DNA作为对照。2、将离心管置于冰上,按顺序加入下列试剂:①1μg~3μg新鲜变性
结构上非常相似的物质,甚至能识别立体异构体。 3.应用范围广据不完全统计,目前至少已有300多种生物活性物质已建立了RIA。它几乎能应用于所有激素的分析(包括多肽类和固醇类激素),还能用于各种蛋白质、肿瘤抗原、病毒抗原、细菌抗原、寄生虫抗原以及一些小分子物质(如环型核苷酸等)和药物(如地高辛、毛地黄甙等)的分析,应用范围还在不断扩展。近年来由于小分子半抗原制备抗体的技术有很大的发展,有人预测几乎所有的生物活性物质,只要其含量不低于RIA的探测极限,都可建立适当的RIA法。 4.
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