海藻糖合成酶(TS)测试盒_微量法

海藻糖合成酶(TS)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/48样
储存条件：低温保存
注　意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：
海藻糖是功能性低聚糖，具有非还原性、保湿性、热酸稳定性、抗冻结性等特性，是细胞在不良环境条件下产生的一种重要的抗逆应激物之一，它对生物大分子和生物体组织有着非特异性的保护作用。海藻糖合成酶（Trehalose Synthase）催化麦芽糖合成海藻糖，是海藻糖生物合成的关键途径之一。

测定原理：
TS 催化麦芽糖产生海藻糖，使用糖化酶分解剩余麦芽糖为葡萄糖，通过葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量，按照麦芽糖减少的量表示海藻糖合酶活性。

需自备的仪器和用品：
酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 12mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 12ml×1 瓶，4℃保存，充分混匀，如有沉淀，静置后取上层清液使用；
试剂三：液体 10ml×1 瓶，4℃避光保存；
试剂四：液体 10ml×1 瓶，4℃避光保存；





测定步骤：
1、在 EP 管中加入如下试剂
1、在 EP 管中加入如下试剂

试剂名称（μL）	对照管		测定管
样本			100
95℃水浴灭活样本	100
试剂一	100		100
混匀，40℃水浴反应 2h，95℃水浴 10 分钟终止反应，冷却至室温。
试剂二	100		100

混匀，60℃过夜反应，10000g 25℃离心 10min，取上清待测。

2、工作液配制：临用前将试剂三和试剂四按照 1:1 的比例混合，用多少配多少。

3、在 96 孔板中加入如下试剂

上清	20	20
工作液	180	180

混匀，室温反应 30min，于 505nm 下测定吸光值 A 对照与 A 测定，ΔA=A 对照-A 测定。
每个测定管设一个对照管。