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- 2026年04月17日
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- 提供商：
威斯腾生物
- 服务名称：
CRISPR/Cas9 基因敲除细胞
活动内容：
1、服务类型：CRISPR/Cas9基因敲除细胞系 2、服务周期：2-4个月
3、服务承诺：单抗隆细胞株 4、活动价格：1.7万元
CRISPR/Cas9细胞敲除服务：
CRISPR/Cas9系统是目前基因编辑最高效的系统之一，已被广泛用于多种生物系统，包括人类细胞、斑马鱼、小鼠、大鼠、植物及细菌等。威斯腾生物提供基于CRISPR/Cas9技术的目的基因敲除细胞株，通过优化设计多条gRNA并进行生物学筛选验证，确保敲除效率优化，进而构建经过测序验证的目的基因敲除稳定细胞株。
服务流程：
1、细胞预实验（细胞传代能力、单克隆能力）；
2、gRNA设计合成、载体构建；
3、细胞转染、单克隆筛选；
4、多代次测序鉴定。
服务优势：
1、细胞种子优良：所有细胞均从中科院细胞库购买，代数低无污染
2、敲除性状稳定：所有的敲除单克隆均通过多代次测序验证，确保敲除性状稳定不回复，可以直接用于后续功能验证。
3、有效敲除：多条gRNA+多样化的敲除策略，确保目的基因有效敲除，有效降低脱靶对敲除效果的影响；
4、活力无损：严格的质控指标，建系后连续3代细胞增殖活力评估。
交付内容：
1、经测序验证的目的基因敲除细胞株及对照细胞株各2支（每支细胞量不少于1*10^6）；
2、完整实验报告（包括细胞株培养信息、实验步骤、gRNA序列及其测序峰图、单克隆筛选测序验证报告）。
说明：
本活动的最终解释权归威斯腾生物所有！
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
分为五步，即gRNA文库选择、gRNA文库扩增、gRNA文库慢病毒包装、gRNA文库筛选、PCR扩增和NGS测序 1、gRNA文库选择 首先客户选择所需gRNA文库。如果客户根据具体需要提出文库定制（小于300个基因），我们将根据客户提供的基因群信息进行单个基因的gRNA设计，保证每个基因设计3个不同的gRNA，最大程度确保基因功能的突变。我们采用的载体是单/双慢病毒载体，单慢病毒载体是一个载体上同时携带单个gRNA和cas9基因，双慢病毒载体是一个载体上只有单个gRNA，cas9蛋白则由单独
手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
一、CRISPR-Cas 系统简介图 1 CRISPR-Cas9 系统介绍CRISPR-Cas9 系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具，它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9 系统包括：Cas9 酶和一个向导 RNA。 向导 RNA 作用是引导 cas9 到基因组的特异性位点上切割。如图 1 所示。目前为止，CRISPR-Cas9 系统主要有两方面应用: 基因敲除和基因敲入。基因敲除时, 一旦 DNA 的双链断裂反应（DSB）被 Cas9 切割诱导发生, 细胞会启动 NHEJ
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