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BrainVTA
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原理介绍
单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)属于疱疹病毒科、α疱疹病毒亚科,有HSV-1和HSV-2两种亚型。HSV感染宿主范围广,能有效感染啮齿类动物和灵长类动物等。H129是HSV-1型病毒的临床分离株,经过多年在各种动物模型的活体测试,发现其在外周神经系统以及中枢神经系统都具有严格顺向跨突触的特性。经过改造的病毒,装入荧光蛋白后可以实现高效、稳定的顺行跨突触标记神经元网络的功能。适合于神经输出环路的顺行示踪研究,在解析大/小鼠及非人灵长类、及其他各种哺乳动物和禽类实验动物的神经信息向下游输出环路的研究中极具价值。HSV-1型H129株具有特异顺向跨突触的特性。病毒感染神经细胞后,在胞内复制并表达目的基因,子代病毒经轴突运输到突触前,跨突触进入下游神经元,开始新一轮的复制及跨突触传播等过程。

图1. HSV-H129株特异顺向跨突触传播示意图
应用案例

图2. 利用rH129-EGFP标记小鼠腹侧被盖区(VTA的输出神经环路Science at WIPM)
病毒工具列表
| 产品货号 | 产品名称 | 携带外源基因 | 功能 |
|---|---|---|---|
| H01001 | HSV-EGFP | EGFP | 顺行跨多级,绿色标记 |
| H01002 | HSV-tdTomato | tdTomato | 顺行跨多级,红色标记 |
| H01003 | HSV-H2BEGFP | EGFP | 增亮版跨多级,绿色标记 |
| H01004 | HSV-H2BmCherry | mCherry | 增亮版跨多级,红色标记 |
| H02003 | HSV-LSL-tdtomato-2A-TK(H356) | tdTomato | Cre依赖,跨多级 |

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文献和实验神经元之间的环路连接非常复杂,完整而准确地显示这些环路的结构和变化,对揭示许多疾病的病因和新治疗方法的开发具有非常重要的意义。传统的神经示踪方法如电镜、Golgi染色、染料、肽类标记物等可以显示神经元的形态和投射,少数示踪剂如WGA、TTC等还可以实现跨突触标记,但这些方法都具有信号间接、方向不特异、跨突触后信号衰减严重等缺点,最重要的是,这些染料无法携带基因,因此只能显色。自20世纪80年代,Kristensson首次应用单纯疱疹病毒(HSV)跨突触标记神经元后,各种各样病毒载体在环路示踪
rAAV 在神经科学研究中的应用方向 rAAV 血清型的选择 01 用于神经元示踪的血清型⸺AAV2-retro、AAV1、AAV9 使用 AAV 精确标记神经回路需要考虑可逆性,包括神经元的顺行和逆行标记,以及是否跨突触(图 2)。目前,只有两种血清型可 以用于神经元顺行标记,即 AAV1(图 3)和 AAV9,高滴度的 AAV9 可顺向跨突触。唯一可用于逆行标记是 AAV2-retro(图 4)。 图 2 AAV 等工具病毒在神经环路示踪应用中的传播方向和层级 [Neurosci
的起始因子。在一项新的研究中,中国南开大学曹雪涛(Xuetao Cao)院士及其团队研究了与单纯疱疹病毒 - 1(HSV- 1)的基因组 DNA 结合的核蛋白,以及与在病毒感染后迁移到细胞质中的核蛋白。相关研究结果于 2019 年 7 月 18 日在线发表在 Science 期刊上,论文标题为 「Nuclear hnRNPA2B1 initiates and amplifies the innate immune response to DNA viruses」。曹雪涛团队发现 hnRNPA2B1
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