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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Acr/Bis Premixed Powder(19:1) 40%
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
2袋/包(100 mL/袋) /10袋/包(100 mL/袋)
| 规格: | 2袋/包(100 mL/袋) | 产品价格: | ¥228.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10袋/包(100 mL/袋) | 产品价格: | ¥488.0 |
储存条件:RT
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文献和实验,最长使用时间一般不宜超过3天。标记好的探针可以保存在 -20℃。3. EMSA 胶的配制:(1) 准备好倒胶的模具。可以使用常规的灌制蛋白电泳胶的模具,或其它适当的模具。最好选择可以灌制较薄胶的模具,以便于干胶等后续操作。为得到更好的结果,可以选择可灌制较大 EMSA 胶的模具。(2) 按照如下配方配制20毫升4%的聚丙烯酰胺凝胶(注意:使用29:1等不同比例的Acr/Bis对结果影响不大)。TBE buffer (10X) 1毫升重蒸水 16.2毫升39:1 acrylamide
,室温保存。脱色液在 90 ml 甲醇:水(体积比 1:1)和 10 ml 冰乙酸混合液用 0.45/0.22um 的膜抽滤,室温保存。1X Tris - 甘氨酸电泳缓冲液 (即 Running buffer)25 mmol/L Tris250 mmol/L 甘氨酸0.1%(m/V)SDS同样可以扩大配方为 5X 的储存液。30% 丙烯酰胺混合液(100 ml)29.2 g 丙烯酰胺(Acr)0.8 g 亚甲基双丙烯酰胺(Bis)10 g SDS 外包锡纸,4℃ 冰箱保存二、制胶选择胶板(0.75
,蛋白分子量小就要制高浓度的胶,分子量大的蛋白就制低浓度的胶,制不同厚度的胶所需的浓缩胶和分离胶体积也不一样。5%浓缩胶:30%Acr-Bis 1ml、A溶液1.5ml、无菌水3.5 ml、APS 75ul、TEMED 10ul。12.5%分离胶:30%Acr-Bis 5 ml、B溶液3 ml、无菌水3.9 ml、APS 150ul、TEMED 10ul。 加样、电泳过稍许时间等胶凝固后把蛋白marker和所需的鉴定的蛋白经处理后加到加样孔中,倒入电泳缓冲液接通电源开始跑胶。 染色、脱色
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