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柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×)规格

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      上海邦景

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      125ml

    产品细节图片1
    产品名称:柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×)规格
    英文名称:Antigen Retrieval Buffer (40×Citrate-EDTA, pH 6.2)

    产品规格:125ml
    发货周期:13
    免疫染色实验,细胞或组织往往需要经多醛、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构,然而此步操作通常会封闭抗原决定簇,使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应,从而引起染色信号衰减,甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于:1)醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键,从而封闭抗原表位;2)醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联
    注意事项:
    1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
    2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
    3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
    4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
    5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。

    产品细节图片2
    操作步骤:
    1. 样品染色
    1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
    2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
    对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
    3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
    4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
    5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
    2. 样品检测
    1) 流式细胞仪检测:
    染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
    建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
    2) 荧光显微镜检测:
    染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
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    25二羟基本酸shēng huà shì jì容量:25
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    格拉司琼相关物质A Grcnisqtron Rqlctqd CoMpound c;2MqthylN[(1R,3r,5S)9Mqthyl9czcbicyclo[3.3.1]non3yl]2Hindczolq3ccrboxcMidq
    微球菌粉 BR 30毫克 国产/进口
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    聚醇 Polyvinyl clcohol 9008
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    /e BR%25克 国产/进口
    小鼠Smad同源物3(Smad3)ELISA试剂盒 ,英文名: Smad3 ELISA Kit
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    大鼠氧化酶(XOD)免疫试剂盒 Rat Xahine Oxidase,XOD ELISA Kit
    英文名称RatApelin-12ELISAKit大鼠Apelin-12规格:96T/48T
    裂解液不确保细胞内活性的成分制备
    ELISAKitUP
    柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×)规格人高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
    小鼠白介素1α(IL-1α)免疫试剂盒 Mouse Ierleukin 1α,IL-1α ELISA kit
    腺苷脱酶(ADA)ELISA试剂盒 ,英文名: ADA ELISA Kit
    Mouseierferon-inducibleprotein10,IP-10ELISA试剂盒小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    ELISAKitsE-selectin兔子可溶性E选择素
    公司优势:
    1.柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×)规格具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
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