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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Yeast tRNA solution (5mg/mL, high purity)
- 保质期:
两年
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
2×1mL
酵母tRNA溶液(5mg/mL,高纯)
产品储存:-20℃保存,有效期两年。
产品说明:
酵母tRNA是以粗品酵母tRNA为原料,经过纯化后,用分光光度计测定浓度纯度后定量稀释为5mg/mL浓度。
本产品可以用于微量 RNA 的提取和助沉剂使用,也可以应用于原位杂交,Northern 杂交,对于探针为 RNA 的杂交实验尤其适用。
使用方法一:(作为核酸助沉剂使用)
1. 乙醇沉淀法沉淀 DNA 或 RNA。在核酸溶液中加入 1/10 体积的 3M 乙酸钠(pH5.2),再加入 2 倍体积的无水乙醇。
2. 再加入终浓度为 20ug/mL 的酵母 tRNA 溶液,震荡混匀后置于-20℃冰箱 15min(时间可以延长或过夜)。
3. 高速(12000-15000rmp/min)离心 15min 以上,小心吸弃上清。
4. 75%乙醇洗涤沉淀,12000-15000rmp/min 离心 5min,小心吸弃上清。
5. 略作干燥后溶解于 TE 或者 DPEC 水中。
注:由于 tRNA 是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的 DNA 或 RNA 要用于此类反应,就不能使用 tRNA 作为助沉剂。如果回收的 RNA 要用于 RT-PCR,使用 tRNA 可能会对反应的特异性产生干扰。
使用方法二:(作为杂交封堵剂使用)
本产品可以作为原位杂交、Northern 杂交和 RNA 斑点杂交的封堵剂,也可以作为 Southern 杂交和DNA 斑点杂交的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为 100ug/mL。如果使用 RNA 探针,最好使用本产品做封堵剂,以保护 RNA 探针。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验得到所需的蛋白质,为目前所常用的技术方法。 His-tag系统有很高的蛋白产量(5–40 mg/ml resin),但理想情况下的纯度约为80%左右。但如需在随后的分析中测量蛋白质的功能,就需要再进行更多的cleaning steps。 Strep-tag®系统一步纯化满足的纯度可达到95%,无需进行更多的纯化步骤即可直接进行蛋白的分析。产量数据为16 mg/ml。 深度对比Strep-tag®与His-tag系统 His-tag是以6个组氨酸残基组合的融合标签,其基于蛋白质表面的组氨酸残基侧链
系统,都使用了亲和层析法来纯化得到所需的蛋白质,为目前所常用的技术方法。 His-tag 系统又很高的蛋白产量(5~40 mg/mL resin),但理想情况下的纯度约为 80% 左右。但如需在随后的分析中测量蛋白质的功能,就需要再进行更多的 cleaning steps; Strep-tag® 系统一步纯化满足的纯度可达到 95%,无需进行更多的纯化步骤即可直接进行蛋白的分析,产量数据为 16 mg/mL。 深度对比 Strep-tag® 与 His-tag His-tag
加入反应基质。 基质浓度、产物浓度以及细胞浓度均随反应进行的时间而变化,尤其是菌体本身将经历不同的生长阶段(在培养的过程中,微生物 的生长可分为迟缓期、对数生长期、减速期、静止期),显示出不同的催化活力。 基本特征是:反应物料一次加入一次卸出;反应器物系的组成仅随时间而变化,即随着培养的进行,基质的浓度下降,菌体量增加,产物增加。因此它属于一非稳态过程。 三、主要试剂与设备 酵母、培养基、菲林试剂、0.05N NaOH 1mg/ml葡萄糖标准溶液
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