- ￥228 - 1008
- 博尔森/BIOESN
- BES21861KB
- 中国
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
MTT stain Solution(5mg/ml)
- 保质期：
1 年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100mL /10mL /10mL×10
| 规格： | 100mL | 产品价格： | ￥748.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 10mL | 产品价格： | ￥228.0 |
| 规格： | 10mL×10 | 产品价格： | ￥1008.0 |
MTT溶液（5mg/mL）
储存条件： -20℃保存，有效期 1 年。
产品内容：
产品介绍：
MTT 可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物 formazan，在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解，然后通过酶标仪可以测定 490nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。
使用说明：
1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，分于 96 孔板，每孔 180μL，3000-10000 个细胞/孔。（贴壁细胞需用胰蛋白酶消化）
2. 置 37℃、5%CO2 温箱培养使细胞贴壁，培养 6-24 小时。
3. 加入适当浓度的受试化合物，继续培养适当时间。
4. 小心吸去上清，加入 90μL 新鲜培养液，再加入 10μL MTT 溶液，继续培养 4 h。
5. 然后吸掉上清，每孔加入 110μL Formazan 溶解液，置摇床上低速振荡 10 min，使结晶物充分溶解。
在酶联免疫检测仪 490 nm 处测量各孔的吸光值。
6. 同时设置调零孔（培养基、MTT、 Formazan 溶解液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解 介质、培养液、MTT、 Formazan 溶解液），每组设定 3 复孔。
注意事项：
1. 由于使用 96 孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于 96 孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加 PBS，水或培养液；另一方面， 可以把 96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2. MTT 溶液为黄色需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。 Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以 37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔.建议设5个，否则难以反应真实情况3.5%CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。4.每孔加入20ulMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液。5.终止培养，小心吸去孔内培养液。6.每孔加入150ul二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联
Na2EDTA•2H2O，用NaOH调pH至8.0（约需2 g 左右的固体NaOH），溶解后定容至100 ml。（6）GUS酶提取液：0.1 M 磷酸缓冲液（pH7.0）取50 ml；10% SDS取1 ml； 0.5 M EDTA(pH8.0)取2 ml；Triton X-100取100 ul；β-巯基乙醇100 ul；用水定容至100 ml。（7）MUG底物：称8.8 mg MUG，溶于10 ml GUS酶提取液中，配制成2 mmol/L 的工作浓度。（8）反应终止液（0.2 mol/L Na
洗液2-3 h，但不要太长，否则板就黄了。还有一点，旧板的细胞培养时贴壁较差，可以铺多聚赖氨酸试试。如果你的细胞不好养，尽量不要用旧板。问：加MTT孵育4小时后，溶液颜色没有发生太大变化，为黄色。我想请问一下，你的MTT是用无血清培养基配的吗？因为我有一次就是加错了，用正常的含血清培养基配了，结果颜色就不对了，干扰了MTT的检测。丁香网友chinaefulle认为：MTT为淡黄色，用0.1 M的PBS配制，浓度为5mg/ml，配好后直接取20 ul加入到完全培养的细胞孔中（总体积在200 ul左右，MTT
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