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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Pichia Adenine Dropout Medium Plates
- 保质期:
6 个月
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
10块
毕赤酵母PAD平板(φ9cm)
产品储存:2-8℃避光保存,6 个月有效
产品说明:
PAD Agar 培养基主要用于 PichiaPink 毕赤酵母系统转化子的筛选培养。由 YNB、除腺嘌呤外的必要氨基酸混合物、生物素、琼脂等复配而成,在高温高压灭菌过程中,因培养基中丰富的氨基会与葡萄糖发生美拉德反应(褐变反应)产生 5-羟甲基糠醛,培养基颜色变深,而糠醛对毕赤酵母菌体的生长有一定的抑制作用,因此该培养基需要单独补入过滤除菌的葡萄糖作为碳源。
成分含量(g/L):

注:
用 Spe I 单酶切线性化质粒 pPinkα-HC 和 pPinkα-HCMCRA电转化至毕赤酵母 PichiaPink 原始菌,涂布于 PAD 选择性培养基筛选转化子。PichiaPink 原始菌为腺嘌呤营养缺陷型,嘌呤前体会在菌体内液泡积累,而造成在 PAD 平板上生长时呈现为红色菌落。重组子因从线性化的质粒 pPinkα-HC或 pPinkα-HC-MCRA 获得了该基因,恢复了从头合成腺嘌呤的能力,不在积累前体,在 PAD 培养基生长时呈现为白色菌落,故而利用这个特性来筛选重组子。
注意事项:
1. 该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
2. 注意无菌操作,避免微生物污染。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验基作点种分离纯化,挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板,4℃保存。2、pPICZαA原核宿主菌TOP10F’的活化培养TOP10F’做为菌种保存在-70℃条件下,在进行扩大培养抽提质粒之前,先要进行活化培养。接种TOP10F’于5ml LLB(加入25ug / ml Zeocin)中,37℃,200 rpm ,培养16~18小时。3、毕赤酵母表达的试验方法3.1线状质粒DNA的脱磷酸化处理重组载体只有被酶切线性化整合效率才能大大提高,环状质粒整合效率是很低的。选用不同
3复孔,设正常对照3复孔。以10-14天细胞全部死亡的浓度为筛选浓度,结果为200mg/L。2、在转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到60%-80%覆盖。一般要求,6孔培养皿(35mm),每孔1-2ml培养基3×105细胞。依据不同大小培养板调整每平方厘米的细胞数量。典型贴壁细胞平板密度培养板大小 生长面积(cm2)大约细胞数 培养基容积(ml)组织培养皿(φ60mm)28 6.6×105 5-66孔培养板(φ35mm)9.5 3×105
下面列出了本书中所有的符号的意义及单位(除非无量纲)。如收中已有定义式,方程序号则在说明后的括号中标出。 > A:吸收度(式3.1,3.2)也作面积 CAN:乙腈(acetonitrile) B(%B):二元流动相中的强溶剂(% v/v) C8,C18:烷基键合相的键长度(八烷基或十八烷基) CD:环糊精(cyclodextrin) CV:变异系数(通常以%表示)式15.3 dC:色谱柱内径(cm) dP:颗粒直径(μm) DAD:二极管阵列检测器 EC:电化学(检测
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