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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Lyticase working buffer(without Lyticase)
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
100mL
储存条件:RT
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文献和实验小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血,加入 1 Test 对应流式抗体,混匀,4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞,用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项: 采血用抗凝管,有肝素和 EDTA 两种,若直接裂解
] 。在上述基础上,我们进一步优化了分离方法,并将其用于本实验室大规模的叶绿体分离和蛋白质组分析工作中 [16] 。这种方法没有进行过叶绿体蛋白质输入活性的测试,但是本方法具有产率高,污染低的优点,尤其适合于叶绿体的蛋白质组分析。关于用于体外蛋白质输入活性试验的叶绿体分离方法,可以参考其他的一些报道 [17] 。2. 材料 ( 1 ) 介质 A ( 匀浆缓冲液,见注释 1):50 mmol/L HEPES-KOH ( pH 8.0) 、330 mmol/L 山梨醇、2 mmol/L EDTA
6.0磷酸钾 1.34%YNB 4×10-5%生物素 0.5%甲醇 1. 灭菌700ml 水, 2. 冷至室温,加入下列:100ml 1M pH6.0磷酸钾缓冲液, 100ml 10×YNB, 2ml 500×B, 100ml 10×M 3. 放置于4 度,可放2 个月 10×YNB (13.4%酵母氮源碱(YNB)含硫酸铵不含氨基酸) 溶解134gYNB于1000ml水中,过滤除菌,加热至YNB 完全溶解,存于4 度。或者用34gYNB(不含
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