蛋白凝胶银染试剂盒

蛋白凝胶银染试剂盒

储存条件：RT，保质期 1 年。

产品内容

产品说明：

本试剂盒采用高灵敏度的银染染料，可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色，具有目的条带清晰、背景低、操作时间可灵活控制的优点。另外，本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤，可明显降低背景及提升目的条带的亮度。

使用说明：（需自备无水乙醇）

以下操作步骤中各溶液的用量以大小为 8.5×5.5 cm、厚度为 1.0 mm 的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，置于摇床上操作，一般用量 25 ml。对于大型凝胶，各溶液的配制量需按凝胶体积的比例放大。

注：实验前准备 50 ml 固定液（：乙醇：超纯水=1:4:6）、50 ml 洗脱液（10%乙醇）和 50 ml终止液（5%的）。

1．水洗：电泳完成后，用超纯水洗胶 2 次，每次洗涤 5 分钟。

2．固定：用 25 ml 固定液固定凝胶 2 次，每次固定 15 分钟。

3．洗脱：用洗脱液洗胶 2 次，每次洗涤 5 分钟。

4．水洗：用超纯水洗胶 2 次，每次洗涤 5 分钟。

5．增敏：将上一步洗好的凝胶置于增敏液中，室温下准确孵育 1 分钟后用超纯水洗胶 3 次，每次洗涤 20秒。增敏液的配制：取 A 液 125 μl 加入到 25 ml 超纯水中，混匀。

6．银染：弃去超纯水，将凝胶置于银染工作液中孵育 30 分钟。银染液的配制：取 B 液 250 μl、D 液 50 µl加超纯水至 25 ml，混匀。

7．水洗：用超纯水快速洗胶 2 次，每次洗涤准确控制为 20 秒。

8．显影：立即将洗好的凝胶浸没在显影液中，室温孵育 2-3 分钟，直至蛋白条带显示清晰。显影液的配制：取 C 液 5 ml、D 液 30 µl 加超纯水至 25 ml，混匀。

注意：显影 30 秒内，蛋白条带开始显现，继续显影至 2-3 分钟。若蛋白条带显色较浅，可适当延长显影时间至 5 分钟或以上。

9．终止：弃去显影液，将凝胶浸泡在终止液中反应 10 分钟。

注意事项：

1．提前准备固定液、洗脱液和终止液；实验前配制增敏液、银染液和显影液，现配现用。

2．操作时请使用超纯水和洁净的玻璃或塑料器皿，须戴一次性手套进行操作。

3．整个银染过程需在摇床上进行，摇床转速约 60 rpm 左右。

4．需自备乙醇、超纯水。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！