- ￥578
- 博尔森/BIOESN
- BES20999KB
- 中国
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
YEP Medium
- 保质期：
3年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
常温
- 规格：
500g
农杆菌YEP肉汤（增菌）
储存条件：常温保存，3 年有效。
产品说明：
YEP 培养基（Yeast Extract Peptone Broth Medium）常用于农杆菌的增菌培养。酵母浸粉和蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠可维持均衡的渗透压。
成分组成：(g/L)
配制方法(仅供参考)：
1. 称取适量培养基，加蒸馏水至 1 L，搅拌均匀，调 pH 值至 7.0±0.2。
2. 121 ℃高温灭菌 15 min 或 115 ℃高温灭菌 20 min。
3. 固体培养基冷却到 50-60 ℃，加入抗生素，倾倒平皿，
4 ℃避光保存备用。
农杆菌感受态制备(仅供参考)：
1. 活化：将农杆菌菌种（-80 ℃）室温解冻，划线至 YEP平板上（50 mg/L Rif）28 ℃过夜活化。
2. 小摇：挑取单克隆接种于 5 mL 液体 YEP 培养基，28 ℃，200 rpm 培养过夜。
3. 大摇：取 2 mL 过夜菌液接种于 50 mL 液体 YEP 培养基中，28 ℃生长至 OD600约等于 0.5 左右。
4. 离心：采用 1.5 mL 离心管，4 ℃，4500 rpm 离心 10 min，弃上清，收集菌体。
5. 取现配的 0.1 mol/L 的 CaCl2溶液 400 μL 溶解上述菌块，冰上静置 30 min；
6. 再次离心，用 100 μL 的 CaCl2溶液溶解上述菌块，即为农杆菌感受态。
注意事项：
1. 注意无菌操作，避免微生物污染。
2. 根据菌株生长特性，可适当调整 pH 值。
3. 该培养基仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其它用途。
4. 称量时注意粉尘，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
5. 干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖，避免吸潮结块。未开封产品保质期三年，开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验成分 蛋白胨1 10g 葡萄糖 5g 牛胆盐 20g 磷酸氢二钠 8g 磷酸二氢钾 2g 煌绿 0.015g 蒸馏水 1000mL pH7.2 制法 按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶30mL，115℃高压灭菌15min。
成分 肉浸液肉汤(或牛肉膏汤) 1000mL 磷酸氢二钾 1g 2%煌绿溶液 0.5～10mL 制法 1 将肉浸液肉汤加入磷酸氢二钾(原已有磷酸氢二钾者可不加)，校正pH，分装烧瓶，每瓶100mL， 121℃高压灭菌20min。 2 2%煌绿水溶液于临用前配制。 3 按比例［见GB 4789.19—94《食品卫生微生物学检验蛋与蛋制品检验》］于肉汤内加
制备转化用的农杆菌菌液 1．灭菌 试管 400毫升细长烧杯2瓶，离心瓶4-6个（250ml）。 2．试剂：YEP 1200ml（每瓶300ml 共4瓶）+Kan 1;1000，Rif1:500。 1/2MS+2%蔗糖（灭菌115度20分钟），Silwet在-20℃贮存。 3．步骤： 共转化农杆菌：于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul：10ml接种。28℃，3000rpm摇过夜，约30小时，次日下午6点将已摇活的菌按（1：400）及750
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