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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Modified CAS Medium
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
1L
货号:BES20792KB
规格:1L
储存条件:RT
包装内容:改良CAS液体培养基套装
| 组分 | 名称 | 规格 |
| 20792A | 培养基基础 | 121g/瓶 |
| 20792B | 10×缓冲剂 | 100mL/瓶 |
| 20792C | 10×CAS检测液 | 100mL/瓶 |
| 说明书 | 一份 | |
产品说明:
CAS(Chrome azurol S)检测液是由铬天青(chrome azurol sulphonate, CAS)、溴化十六烷基三甲铵 (hexadecy- ltrimethyl-ammonium bromide, HDTMA)和铁离子组成的一种复合物,呈亮蓝色。当蓝色检测平板中的铁离子被微生物分泌的嗜铁素夺走时,CAS检测液由蓝色变成橘黄色,因此CAS液体培养基可用于微生物产嗜铁素的检测。
通常CAS液体培养基配制方法较为复杂,Coolaber对其配制方法进行改良,zui大程度减少实验准备时间。该产品分为CAS培养基基础、10×缓冲剂和10×CAS检测液3个部分,其中缓冲液和CAS检测液已灭菌。CAS培养基中Pipes做缓冲剂,蛋白胨和葡糖糖提供氮源和碳源,钙盐和镁盐提供其他生长因子。
产品组成:
| 产品组成 | 成分 | 终浓度g/ |
| 基础培养基 | 葡萄糖 | 100 |
| 蛋白豚 | 20 | |
| 七水硫酸镁 | 0.5 | |
| 氯化钙 | 0.5 | |
| 10x缓冲液(已灭菌) | 100 mL | |
| CAS检测液(已灭菌) | CAS | 0.06 |
| FeCl3 6H2O | 0.0027 | |
| HDTMA | 0.073 | |
| PH | 6.8土0.2 | |
使用方法(仅供参考):
1. 称取培养基121 g,加去离子水定容至800 mL,磁力搅拌溶解;
2. 115 ℃,20 min分别灭菌,冷却至60 ℃,向培养基基础中缓慢加入60 ℃预热的100 mL 10×缓冲液和100 mL 10×CAS检测液;
3. 将适量待测菌接种于CAS液体培养基,28 °C、180 r/min摇床培养,细菌培养2-3 d,真菌培养5-7 d;
4. 取适量菌液10000 r/min离心10 min,再取上清3 mL黑暗中静置30 min,测630 nm处的吸光值(As),以双蒸水为对照调零。另取空白培养基与CAS检测液等体积混匀,以其吸光值作参比值(Ar),据根公式[(Ar-As)/Ar] × 100%计算,即得嗜铁素的相对含量。
5.结果参考,如图1。

图 1 嗜铁素检测
检测菌株:
木霉属Trichoderma spp.、芽胞杆菌Bacillus spp.、气单孢菌Aeromonas sp.、假单胞菌Pseudomonas sp.、绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa、荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescensdeng等。
注意事项:
1. 注意无菌操作,避免微生物污染。
2. 根据菌株生长特性,可适当调整缓冲液的pH值。
3. 该培养基仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其它用途。
4. 称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
5. 干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。贮存于避光、干燥处。未开封产品保质期三年。开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。
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文献和实验孔培养体积缩小为 384 孔和 1536 孔形式的建议体积。由于接种体积和密度可能因细胞类型和下游应用而异,因此建议针对检测方案优化条件。 方法和材料 实验可以是贴壁生长癌细胞系的肿瘤干细胞,亦可是McCoy's 5a 培养基中培养的 T-29 人结肠癌细胞、F-12K (Kaighn's Mod.) 培养基中培养的 A549 人肺癌细胞,MCF7 人乳腺癌细胞。 另外,HTB-22™ 和 DU 145 人前列腺癌细胞均在杜氏改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中培养。所有生长培养基均含有
仪OD490nm处测量各孔的吸光值。7.同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)悬浮细胞:1)收集对数期细胞,调节细胞悬液浓度1×106/ml,按次序将①补足的1640(无血清)培养基40ul ;②加Actinomycin D(有毒性)10ul用培养液稀释 lg/ml,需预试寻找最佳稀释度,1:10-1:20);③需检测物10ul;④细胞悬液50ul(即5×104cell/孔),共100ul加入到96孔板(边缘孔用无菌水填充
。 ⑸UltraCHOTM培养基 UltraCHOTM培养基最适于培养转染和未转染的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞,表达重姐蛋白质。UltraCHOTM培养基以一种改良的DMEM培养基(F-12)为基础,在此基础上添加胰岛素,转铁蛋白以及专利性的纯化蛋白等成分而成。有UltraCHO液体培养基(1X)和干粉培养基(含冷冻添加剂)两种类型的产品可供选择,培养基蛋白含量低于300ug/ml. 应用:培养CHO细胞; 重组蛋白的合成。 ⑹ProCHOTMCDM系统 ProCHO限定培养基
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