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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
BMGY & BMMY Base
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
10×0.5L
BMGY & BMMY基础培养基
产品说明:
BMM 培养基(Buffered Minimal Methanol Medium)是含有甲醇的缓冲性基础培养基,用于甲醇诱导的毕赤酵母重组菌株的蛋白表达。
BMMH 培养基(Buffered Minimal Methanol + Histidine)是含有组氨酸的缓冲性基础甲醇培养基,用于甲醇诱导的毕赤酵母重组菌株的分泌蛋白表达。
BMMY 培养基(Buffered Methanol-complex Medium)是含有甲醇的缓冲性复杂培养基,用于甲醇诱导毕赤酵母重组菌株(如 GS115、KM71、SMD1168 等)分泌表达目的蛋白,如甲醇诱导 AOX1 启动子驱动的蛋白表达。BMMY 培养基具有可控的 pH 值,能够降低蛋白酶活性。以甘油作为直接碳源和能量来源,发酵过程中不产酸。
BMM 培养基适用于具有 AOX1 起动子的分泌表达载体如 pPICZα A,B,C 、pPIC9K、pPIC9、pPinkα-HC。
产品成分:(g/L)

使用方法:
1. 即用型 BMM 系列培养基成分参照上表,均已过滤除菌,开盖即用。
2. BMGY & BMMY 基础培养基为固体粉末,称量 43.4 g,加蒸馏水至 900 ml,溶解,121 ℃灭菌 20 分钟。
3. 冷却后加入 100 ml 单独高压灭菌的 1 M 磷酸钾缓冲液,和过滤除菌的 5 ml 甲醇。
4. 该系列培养基 4℃可以储存 1 个月,-20℃可储存 1 年。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验基础篇-无菌操作基本技术 1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70% ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70% ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。 2. 无菌操作工作区域应保持
程序亦不同, 虽对大部分细胞没有太大之影响, 惟少数细胞则可能因使用厂牌不同之dish 或flask 而有显著之生长差异。 25 购买之细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形? 研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少, 大都是因为离心过程操作上的失误, 造成细胞的物理性损伤, 以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心, 应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。 26 购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?
载体克隆到腺病毒载体 -- 0-15天 4天 获得重组腺病毒 14-21天 17-22天 4-7天 噬斑纯化 5-10天 0-5天 -- 总计 26-45天 24-56天 10-17天 以体外连接方法为基础 (by Mizuguchi和Kay),CLONTECH的Adeno-X™表达系统提供了一种快速、高效构建重组腺病毒的方法。只需4至7天就可以获得重组腺病毒,如图1所示。由于经过7天的培养之后HEK 293细胞会渐渐失去对培养皿的附着而扩散,导致噬斑融合,用传统方法制备重组腺病毒往往需要铺平
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