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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Z buffer
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
500mL
Z buffer
操作方法:
1.为了得到结果,用新鲜的克隆(一般30℃培养2-4天),菌落直径1-3mm。
2.配制Z buffer/X-gal 溶液
3.预先将滤纸放在盛有2.5-5.0ml的Z buffer/X-gal 溶液的培养皿中。
4.用镊子夹取一张干净、干燥的滤纸放在长有菌落的平板上,轻轻用镊子摩擦将滤,帮 助菌落附着在滤纸上。
5.透过滤纸,在三个不同的方位上穿孔(不对称的方位),此方法用于在培养基上确定 滤纸的方向。
6.当滤纸均匀湿润后,用镊子小心将滤纸从培养基上取下,转移到液氮中,浸没在液氮 中10妙。
7.取出液氮中冷冻过的滤纸,室温下融化。
8.小心将滤纸正面朝上,放在第三步预处理的滤纸上,避免在两层滤纸中间产生气泡。
9.将带有两层滤纸的培养皿放于30℃或室温下,定期检查蓝色菌落的出现情况。一般8 小时之内变蓝的可初步定位阳性克隆。
10.在平板上找到与蓝色菌落相对应的菌落,挑相应的蓝色菌落到新的培养基平板 上。
方法改进:
先在一个培养皿中铺一张普通灭菌滤纸,再加2.5-5.0ml Z buffer/X-gal溶液将滤纸润湿;然后将显色滤纸(Whatman 5# 滤纸或Grade 410滤纸)剪成长方形,放在培养皿中,加少量灭菌水润湿,用牙签挑取菌落轻轻在滤纸上划线,直接液氮冷冻10妙钟,取出室温融化,放在预先准备好的滤纸上,避免在两层滤纸间产生气泡。做好标记后, 放在30℃或室温下,定期检查蓝色菌落的出现情况。一般8小时之内变蓝的可初步定位阳性克隆。
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文献和实验【求助】shRNA连接时,如果没有annealing buffer,可不可以用PCR buffer?
bobbymm shRNA要做连接的时候发现 annealing buffer 没有了。可以用 PCR buffer代替不? zhujoker 就用普通的去离子水就可以了,没有那么复杂。不要想当然得使用PCR buffer。 bobbymm 用的是TAKARA的PCR BUFFER ,连接的还不错。 已经送去测序了。 谢谢回复。 本文
当某溶液加入酸或碱时,具有使 pH变化减弱的作用,换言之,此时的 pH变化比纯水小时,称此作用为缓冲作用,称具有这种作用的系统为缓冲系统。现假定被测溶液 1000毫升中加入 dB克当量的强酸或强碱,其 pH仅作 dpH变化,那么缓冲作用的大小,其比为: β为缓冲价或缓冲系数,而 dpH值在当溶液呈碱性变化时为正,呈酸性变化时为负,所以为了使β为正数,而 dB在加碱时取正值,加酸时为负值。
亦称Z带( Z-band)、 Z板( Z-disc)、 Z线( Z-line)。指横纹肌 I带中央部所见到的膜状构造。 Z膜将肌原纤维按横向隔开,从一个 Z膜到邻近的 Z膜成为一个形态单位,称为肌(原纤维)节。 I微丝在 Z膜处截开,分别和 4条棒状 Z微丝相连。
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