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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pCDNA3.1-6×His-Ubiquitin-K48R
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pCDNA3.1-6×His-Ubiquitin-K48R质粒
别称:1×Ub
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
复制子:pUC
感受态:DH5a
培养温度:37度
质粒宿主:哺乳细胞
质粒用途:蛋白表达
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
| pFUPI AoT5Cyp猫头鹰猴基因质粒 |
| pPH37酵母基因质粒 |
| pET28a-PPK大肠基因质粒 |
| pTXB1-Tn5大肠基因质粒 |
| pAX01-PPK大肠基因质粒 |
| pMA2775大肠基因质粒 |
| pdnaKp-EGFP大肠启动子质粒 |
| pcDNA-4mtD3cpv基因质粒 |
| pBAV1k-T5-LUX基因质粒 |
| pTE-10M0X其它基因质粒 |
| pSR58.6蓝藻基因质粒 |
| pTA7002-avrPto番茄基因质粒 |
| pE6c荧光基因质粒 |
| pSK+KanaRpsL抗性基因质粒 |
| pCY 3010-07抗性基因质粒 |
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文献和实验切下来重新构建,希望有经验的大侠能够指点,可以选择些什么样的质粒呀? pcDNA 3.1 就可以了。 最好是带有GFP标记的非病毒质粒, 有的pcDNA3.1有带GFP标记的。 还有个问题请教就是,病毒载体是不是不需要类似于G418筛选的标记呀? 看你实验目的,一般来说,G418是耐药筛选转染后的细胞株,将没转染成功的细胞用G418杀死,但如果只是做基因治疗的话,基因的转染成果与否,感染细胞的效果可以用流式细胞或荧光显微镜看GFP的表达
基因的体外定点突变是常用的分子实验技术,主要用于研究蛋白质结构与功能关系或者验证 microRNA 与靶基因是否结合。今天为大家介绍下基因突变质粒的构建原理与方法。第一阶段:野生型质粒构建1. 引物设计:根据需要验证的基因序列,设计需要扩增的基因片段引物。引物设计方法如下:(1)引物 F:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 1 酶切位点序列 + 基因正向引物序列 - 3’端(2)引物 R:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 2 酶切位点序列 + 基因反向引物序列 - 3’端
基因的体外定点突变是常用的分子实验技术,主要用于研究蛋白质结构与功能关系或者验证 microRNA 与靶基因是否结合。今天为大家介绍下基因突变质粒的构建原理与方法。第一阶段:野生型质粒构建1. 引物设计:根据需要验证的基因序列,设计需要扩增的基因片段引物。引物设计方法如下:(1)引物 F:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 1 酶切位点序列 + 基因正向引物序列 - 3’端(2)引物 R:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 2 酶切位点序列 + 基因反向引物序列 - 3’端










