质粒使用说明书

产品规格：0.5~2μg质粒干粉，保证能转化出来，不保证具体含量，请务必转化提取后再使用。
      保质期限：90天，请尽快转化。
      保存温度：一般在-20℃，置于-80℃保存时间更长。
      运输方式：常温运输，1周内。
      注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。（请向客服QQ索要质粒信息目录）
      使用说明：
            1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
            2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
            3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
            4、42℃热激90s，再冰浴2min；
            5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
            6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
            7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
            8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
            9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。

注意：1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
            2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。