- ￥1200
- YLKBIO
- YLK-ZL0157
- 国产
- 2026年01月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Escherichia coli DH5α(pUC19)
- 保质期：
90天
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
西林瓶
产品名称：DH5α（含pUC19质粒）大肠杆菌
产品规格：西林瓶
有效期：90天，请尽快转化。
保存温度：一般在-20℃，置于-80℃保存时间更长。
运输方式：常温运输，1周内。
应用领域：pUC19质粒提取。
生长条件：37℃；18-24h；好氧
注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。（请向客服QQ索要质粒信息目录）
1.溶解： 收到质粒干粉后，请加入 20μl 无菌水至管底，溶解质粒，室温静置 1min；
2.混合（吸附质粒）： 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀，冰上放置 30min；
3.热激导入： 42℃静置 90s；
4.收缩膜孔： 冰浴 2min；
5.修复培养： 毎管加 800μl LB 液体培养基，37 ℃培养 1h 150 r/min；
6.筛选培养： 将适当体积（100 μl）的复苏细胞，涂布在相应抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（琼脂面务必干燥后）， 倒置培养 12-16h，出现菌落。
7.提取： 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中，震荡培养 12-16h，根据试验需要提取质粒。
DH5α（含pUC19质粒）大肠杆菌培养基：LB+50mcg/ml氨苄青霉素：酵母膏 5.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 10.0g，蒸馏水 1.0L，pH 7.0。121℃，15min灭菌。灭菌结束后，培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素，浓度50mcg/ml。
| pCMV6-ETV5-K263A-m小鼠基因质粒 |
| pCMV6-ETV5-K293A-m小鼠基因质粒 |
| pCMV6-ETV5-S367A-m小鼠基因质粒 |
| pLV-CMV-wnt3a-m小鼠基因慢病毒质粒 |
| pRC |
| pCDNA3.1-GPR35-m小鼠基因质粒 |
| pCDNA3.1-Zeo-GPR35-m小鼠基因质粒 |
| pCDNA6-V5-His-CaV1.2-m小鼠基因质粒 |
| pECMV-Socs3-m小鼠基因质粒 |
| TetO-FUW-OSKM小鼠基因质粒 |
| pLVML-ECMV-Socs3-m小鼠基因慢病毒质粒 |
| pLVML-ECMV-Socs3-m-EF1α-Zsgreen1-Puro小鼠基因质粒 |
| pEGFP-LXRa-m小鼠基因质粒 |
| pEGFP-LXRb-m小鼠基因质粒 |
| pECMV-3×FLAG-HMGB1-m小鼠基因质粒 |
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文献和实验法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞：处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子)：带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞，用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态，然后与 pUC18质粒共保温，实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因，因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性，用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释，在含氨
的DNA分子，大小在1Kb-200Kb左右，通常质粒DNA带有利于细菌在某一特定环境下生存的酶的基因，而使寄主菌表现以下一些表现型: 1．对抗生素的抗性 2．产生抗生素 3．降解有机复合物 4．产生大肠杆菌素 5．产生内毒素 6．产生限制修饰酶 pUC19质粒上带有一个与大肠杆菌抗氨苄青霉素(Ampecillin)有关的基因，它能编码一种β-内酰胺酶，这种酶降解氨苄青霉素，从而消除了抗生素对细胞壁形成的抑制
μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500
