D-虫荧光素钠盐;D-荧光素钠盐

分子式：C11H7N2NaO3S2    分子量：302.31 背景介绍：哺乳动物发光，一般是将萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)基因整合到需观察细胞的染色体DNA上，以表达荧光素酶，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株，当细胞分裂、转移、分化时，荧光素酶也会得到持续稳定的表达。标记后的荧光素酶只有在活细胞内才会产生发光现象，并且发光强度与标记细胞的数目呈线性相关。除萤火虫荧光素酶外，有时也会用到海肾荧光素酶(renilla luciferase)。二者的底物不同，萤火虫荧光素酶的底物是荧光素(D-luciferin,常见钾盐或者钠盐)。二者的发光波长也不一样，前者发光波长在540-600 nm,后者发光波长在460-540nm。荧光素所发的光更容易透过组织，在体内代谢较慢，而且特异性好。所以大部分活体成像实验采用萤火虫荧光素酶基因作为报告基因。 外观：淡黄色粉末 溶解性：water 80mg/ml; 纯度：>98%,实测大于99% 储存条件：-20℃，避光防潮密闭干燥 运输条件：常温运输 产品用途：D-Luciferin作为荧光素酶的底物，存在于多种发光生物体重。在ATP和荧光素酶的催化作用下，荧光素被氧化，产生荧光(560nm)，当底物过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关。编码荧光素酶的Luc基因是植物、细菌、哺乳动物细胞的常见报告基因。由于没有背景干扰，因此可以很容易检测出低至0.02 pg水平的荧光素酶。 荧光素钠盐操作方法 一：体外生物发光试验荧光素试剂的制备 材料 —D-荧光素，钠盐（D-luciferin，sodium  salt ，MB1837） —无菌纯水(美仑货号MA0028) —完全培养基（自行配置） 步骤 1. 用无菌水制备200X荧光素原液（30mg/ml），轻轻颠倒摇动至荧光素完全溶解。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。 2. 将D-luciferin，sodium  salt 溶解于预热好的组织培养基中制备成浓度为150 μg/ml的工作液。用组织培养基1∶200稀释储存液，配置工作液(终浓度150μg/mL)。 3. 去除培养细胞的培养基。 4. 图像分析前，向细胞培养板中添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析。 —注射器滤膜过滤除菌，0.2 μ m *提示：成像前在37℃下对细胞进行短时间孵育可增强信号。