pht43质粒

pht43质粒

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  • YLK-ZL0003
  • 国产
  • 2025年07月12日
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    • 详细信息
    • 技术资料
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      66

    • 英文名

      pht43

    • 保质期

      90天

    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      质粒干粉

    pht43质粒

    产品名称:pht43质粒
    产品规格:质粒干粉
    有效期:90天,请尽快转化。
    保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
    运输方式:常温运输,1周内。
    应用领域:蛋白表达,分泌表达
    生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5a,8057bp)
    注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)
    pht43质粒
    pht43质粒

    1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
    2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
    3.热激导入: 42℃静置 90s;
    4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
    5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
    6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
    7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。

    pht43质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。


    pht43质粒
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