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文献和实验的移液过程提供较好的稳定性,以及在进行自动机械处理时提供更好的机械强度。PCR 平板可分为无裙边,半裙边和全裙边。 无裙边板缺少周围的面板(图 A)。这种形式的反应板可与绝大多数 PCR 仪和实时 PCR 仪的模块适配,但不适用于自动化应用。 半裙边板在板的边缘周围具有短的边缘(图 B),在移液过程中提供足够的支撑,Applied Biosystems PCR 仪大多数均采用半裙边板。 全裙边的 PCR 板具有覆盖板高度的边缘面板(图 C)。这种板形式适用于具有突出模块的 PCR 仪
Applied Biosystems Veriti™ 96-Well Thermal Cycler, Veriti™ Thermal Cycler 技术特点如下: Block Format 0.2 mL Alloy Features Standard 0.2 mL format and sample block. Enabled to run FAST chemistry, Max Block Ramp Rate 3.9 ºC/Sec Max Sample Ramp
来收集单个细胞。每种方法都各有利弊。目前我正在使用流式细胞仪来收集各种细胞类型。FACS将细胞分选到PCR板上,与RT-qPCR仪器兼容。此外,FACS可利用特定的细胞标志物实现细胞富集。FACS的通量比LCM要高得多。但FACS的缺点是你无法观察细胞,确定重要参数,如细胞形态。FACS还需要单细胞悬液,因此,细胞的过去无从知道。 为避免RNA损失,我们使用与下游酶学反应兼容的裂解缓冲液,而无需进一步纯化。目前市场上有一些裂解液可供选择:CelluLyser(TATAA生物中心
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