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pHIL-S1
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- 供应商:
武汉华尔纳生物科技有限公司
- 保存条件:
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Product Introduction
| 品牌 |
华纳生物 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 货号 |
WN-12869 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 规格 |
2ug | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 价格 |
询价 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 货期 |
现货 | ||||||||||||||||||||||||||||||
订购信息
质粒图谱![]() 载体描述pHIL-S1载体的详细信息如下: • pHIL-S1载体大小8,260 bp,是融合表达载体。 • 载体构建过程中,可供使用的单一限制性内切酶位点为Xho I, EcoR I, Sma I, BamH I. • 利用PHO1分泌信号肽,分泌表达蛋白基因。 • 在载体构建过程中,你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。 • 毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。 • 为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型) •为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型) •将基因插入GS115的AOX1区域,需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。 |
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武汉华尔纳生物科技有限公司,简称华尔纳生物(Warner Bio),坐 落于武汉生物产业基地·光谷生物城,是一家生物医学资源开发,科研生 产,产品销售集一体的科技型企业。
华尔纳生物(Warner Bio)始终专注于生命科学领域及细胞实验培养 方向,坚持为客户打造优质高效,安全可靠的生命科学产品,我们始终坚 持于以客户为中心、以品质求生存、以价值求发展、以服务求口碑的企业 理念,从而获得全国广大科研用户的一致认可。
团队以高效的服务品质,专业卓越的技术能力构建了华中地区最大的 生物细胞资源典藏中心,经过多年不懈的努力与发展,现与武汉大学、华 中科技大学、武汉协和医院、武汉同济医院、四川大学华西医院、首都医 科大学、中山大学附属第三医院等全国多所高校、医院、研究所单位达成 长期稳定的合作,同时为科研人员提供免费专业的售前售中售后服务,为 您的科研实验保驾护航。
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文献和实验一,酵母表达系统毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K,宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二,原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性带His标签(C端):PET21-(a)氨苄抗性带His标签(N端)+TrxA(硫氧还蛋白):PET-32
或S1作图精确定位TSS 引物延伸及s1核酸酶 保护 2)启动子区域(顺式作用元件)的确定 a)生物信息 学预测启动子区域 b)克隆5’-flanking sequence,并连接到报告基因 载体中 c)缺失、突变 d)荧光素酶活性分析 e)确定转录调控区域(启动子区域) 3)转录因子(反式作用元件)结合位点的确定 a)生物信息学预测转录因子结合位点 b)实验证实转录
体质粒,所以一般用整合型载体作为外源基因的表达载体,目前常用的表达载体多是美国Invitrogen公司开发构建的。P.pastoris既有分泌表达型的,又有胞内表达型的。常用的表达载体主要有:pPIC9,pPIC9K,pHILS,pAO815,pHILD2和pPICz等,其中pPIC9,pPIC9K和pHILS为分泌型表达载体,而pAO815,pHILD2和pPICz为胞内型表达载体,不同载体除具有各自特殊的基因组件外,还具有一些共同的序列,如这些载体都包括一个表达盒(cassette)和一
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