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武汉三鹰生物技术有限公司
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多克隆抗体制备
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文献和实验【实验 目的 】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验 原理 】 当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗体
制备多克隆抗体的佐剂 如用可溶性蛋白质抗原免疫家兔或山羊,在加用佐剂时一次注入量一般为0.5~1mg/kg。如不加佐剂,则抗原剂量应加大10~20倍。佐剂有福氏(Freund’s)佐剂、脂质体佐剂、氢氧化铝佐剂、明矾佐剂以及免疫刺激复合物(immune stimulating complex,ICOM)等。 其中最常用的是福氏佐剂,根据其组成分为完全福氏佐剂(CFA)和不完全福氏佐剂(IFA)两种。IFA通常由羊毛脂1份、石腊油5份组成,每毫升IFA中
一、器材 剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布等。 二、试剂 生理盐水(或PBS) 弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant, FCA) Sigma F-5881 弗氏不完全佐剂(Freund’s incomplete
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