前脂肪细胞_大鼠原代细胞

正常大鼠前脂肪细胞的培养

甲腺原氨酸（T3 ）200pmol/L；       8. 筛网：孔径为25μm的尼龙网筛。         实验方法：       1. 取材       ① 取用普通食物喂养的4周龄雄性大鼠，乙醚麻醉后断头处死；       ② 在无菌条件下从附睾周围切取脂肪垫，放入培养皿中。尽量除去血管。然后用清洗液冲洗3次；         2. 分离细胞       ①  充分剪碎所取脂肪细胞。然后放入消化液中，37℃水浴中振荡消化40

原代培养人前脂肪细胞

吸管反复吹打使组织块分散，然后通过孔径25μM（200目）的筛网过滤，收集滤液和未过滤的组织块。5、将滤液以600g离心5分钟弃上清，加入原代培养的基础培养基制成细胞悬液。6、将未滤过的组织按照上述过程再处理一次，将俩次获得的细胞悬液混匀计数，按照104个/cm2的密度接种于培养瓶里，于37度，5％CO2培养箱中培养。接种12－16小时基本贴壁。在增殖状态下的前脂肪细胞可以使用胰蛋白酶消化的方法传代，并且可以冻存和复苏。

正常小鼠前脂肪细胞的培养

组织，洗净血污。称取脂肪垫的重量； 2. 分离细胞； ① 将脂肪垫剪成1mm3 左右的小块，转入50ml锥形离心管中； ② 每0.1g组织块加入3—4ml消化液。在37℃水浴摇床上以60r/min的转速轻微振荡，消化1h。其间每隔10min取出离心管，摇动，使组织块与消化液充分混匀； ③ 消化完后，用吸管反复吹打消化液，分散组织块，制成细胞悬液； ④ 用孔径为250µm的尼龙网筛过滤细胞悬液，除去未分散的组织块，收集滤液。将滤过液再用孔径为80µm的尼龙网筛过滤，除去大部分成熟脂肪细胞