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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99999
- 英文名:
CLIP-qPCR Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
广州伯信生物科技有限公司
- 保存条件:
4℃、-20℃
- 规格:
30T
2019年10月新中国成立70周年之际,《科技日报》整理了35项卡中国脖子的关键技术,其中第八个就是iCLIP技术。iCLIP是一种新兴的实验技术,是研发创新药的最关键的技术之一。它的发明,让人们抛弃精密的观测仪器,也能确定RNA(核糖核酸)和蛋白质在哪个位置“交汇”,甚至可以读出位点“密码”。iCLIP技术难,犹如万千人海中找一个人,要从几十亿个碱基对找到一个或几个确定的结合点,精确度可想而知。国外研究团队已在此领域展开“技术竞赛”,研究论文以几个月为周期轮番上演,国内实验室却极少有成熟经验。
这世界是属于直面困难、努力拼搏的人们,伯信生物深知CLIP技术无论是对于生物医药最基础的分子研究还是药物“靶点”的筛选及创新都具有非常重要的作用和意义。我们的研发团队潜心研究、历时五年,经过上万次的探索和实践,与国内多个课题组通过实际项目合作开展研发型应用,技术日趋成熟,并将该技术转化成试剂盒产品,成功通过市场的应用检验,方便广大科研和工业客户的应用,填补了国内外这一产品的空白。CLIP-qPCR Kit于2020年1月隆重推出,CLIP-seq Kit于2020年3月上市,必将为科研助力!
全球第一款 CLIP-qPCR kit
产品简介:
CLIP (crosslinking-immunprecipitation)是利用蛋白质和RNA 在365nm 紫外光照射下会发生共价交联的特性,来研究蛋白质和RNA相互作用的重要技术。CLIP-qPCR(crosslinking-immunprecipitation and qPCR)即紫外交联免疫沉淀结合qPCR定量技术,通过免疫共沉淀RBP与RNA的结合复合物,获取消化(蛋白酶K、DNaseI、RNase T1)后的RNA,对RNA 3’端加接头,以及设计不同位点的引物,进行RNA结合蛋白位点的富集效率检测。
技术流程:
产品优势:
1.经紫外照射,细胞内的RNA与相应的RNA结合蛋白交联,增强RNA与蛋白的结合能力;
2.可检测多种RNA,如LncRNA、mRNA、microRNA;
3. CLIP-qPCR可精确定位RNA与蛋白的结合位点;
4.自主知识产权。
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- 内容
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文献和实验- Li K, Chen J, Zhang C, Cheng M, Chen S, Song W, Yang C, Ling R, Chen Z, Wang X, Xiong G, Ma J, Zhu Y, Yuan Q, Liu Q, Peng L, Chen Q, Chen D. The CTBP2-PCIF1 complex regulates m6Am modification of mRNA in head and neck squamous cell carcinoma. J Clin Invest. 2023 Oct 16;133(20):e170173. IF=15.900.
- Yang J, He W, Gu L, Zhu L, Liang T, Liang X, Zhong Q, Zhang R, Nan A, Su L. CircFOXP1 alleviates brain injury after acute ischemic stroke by regulating STAT3/apoptotic signaling. Transl Res. 2023 Jul;257:15-29. IF=10.171.
荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外,qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况: 1. 复孔间重复性差怎么办? 复孔间重复性差一般会有以下两种情况: (1)CT 值很大,如 CT≥ 30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法:如果融解曲线没有杂峰,无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上,那 CT 值为准确的,可多设置
一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
尽量靠在上游引物; 长度 30-45 bp,Tm 比引物高至少 5 ℃; 5』端不要是 G,G 会有淬灭作用,影响定量 四、Real-time qPCR 操作过程 1. RNA 提取和反转录 在抽提 RNA 过程中任一环节的不正确操作都可能导致 RNA 酶的污染。由于 RNA 酶的活性很难完全抑制,预防其污染是十分必要的。在实际的操作中应遵循下面一些原则: 1. 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌,可能污染 RNA 的抽提并成为 RNA 酶的来源。培养良好











