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文献和实验人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
。 5. 每孔加入2ml 1X PBS (BSS-1006-B)稀释AccuMax™溶液(A7089)。将细胞悬浮液置于50ml锥形管中。用1ml 1X PBS冲洗每孔,收集任何剩余的细胞,并加入到50ml锥形管中。移液器上下吹打几次以实现单细胞悬浮状态。 6. 室温下,细胞悬液130 x g离心5分钟。 7. 吸出上清液。 在 2 mL 的 AFE 诱导培养基 I (SCM305) 中重新悬浮细胞沉淀。 使用自动细胞计数器或血细胞计数器对细胞进行计数。 在 PBS 中配制4μg/mL的纤连蛋白 (F
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
-1000 移液器上下吹打 20 次以分散类器官沉淀团。 向类器官悬浮液中加入 5 mL 1X PBS,并在 4 °C 下以 700 x g 离心 5 分钟。如果上清液中存在残留的类器官碎片,则再离心 5 分钟。 吸出上清液并用 1 mL 3dGRO™ 类器官冷冻培养基 (SCM301) 重悬沉淀。 用 P-1000 移液器重悬沉淀 5 次,加入冷冻培养基以获得四个胶滴每毫升每管 将冷冻保存管中的细胞转移到冷冻容器(例如 Mr. Frosty)中,然后放入 -80 °C 冰箱中 24-72 小时
, as illustrated by the homodimerization of the CXCR4 receptor and the recruitment of ??arrestin2 to agonist?activated G?protein?coupled receptors. This noninvasive and homogeneous assay provides a robust and sensitive proteomic platform with applications for basic
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