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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
MKN-7细胞:人胃癌细胞
- 细胞类型:
MKN-7细胞:人胃癌细胞
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
MKN-7
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
MKN-7细胞:人胃癌细胞
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
MKN-7细胞:人胃癌细胞
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
MKN-7细胞:人胃癌细胞
- 规格:
T25培养瓶
| 细胞英文名称 | MKN-7 | 细胞中文名称 | 人胃癌细胞 |
| 形态特性 | 上皮细胞 | 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养体系 | RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS | ||
| 传代方法 | 1:3传代;2~3天1次。 | 传代情况 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | ||
STR:



1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


MKN-7细胞:人胃癌细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验所需的时间就比夏天要长的多。SGC-7901胃癌细胞的消化传代大致步骤同上,但胰酶作用的时候应放在培养箱中,夏天0.1%的胰酶消化2分钟左右就够了,但冬天差不多要8分钟左右MDA-MB-231乳腺癌细胞消化传代基本同MKN-28,只是消化时间可稍长一点,1分钟左右。
本人养胃癌细胞sgc-7901已经半年多了,这半年来,可以说是及其不顺,同门的师哥师姐都说这个细胞很好养,增殖快,传代快,生命力旺盛,不容易感染,然,到我这里似乎就不像他们说的那样,问题接二连三的出现,但我从这一连串的失败中从一个懵懂无知者变成一个动作娴熟的能手,说句实在话还得感谢这批细胞给我带来的宝贵经验。首先我要说一点:无菌操作刚一接手细胞时,无菌相关事项早已耳熟能详,但我的第一批细胞在传第二代时不幸夭折,不明原因,总结一下还应该是操作的问题,被感染,虽没做细菌培养,但还应该是被感染致死
兰州大学第一医院李汛团队首次揭示胃癌演进中mRNA乙酰化修饰新机制
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