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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
BY4742 Strain
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:BY4742酿酒酵母菌
别称: BY4742 Strain
培养基:YPDA
菌株类别:酵母菌
培养条件:28℃,有氧,YPDA
质粒转化:电激
保存方式:30%甘油,-20℃
基本应用:用于蛋白表达
备注:
质粒简介:详询
质粒图谱
质粒序列:详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P0506/pPICZαB毕赤酵母质粒 |
| P0239/pPICZαC毕赤酵母质粒 |
| P0217/pGAPZA毕赤酵母质粒 |
| P0218/pGAPZB毕赤酵母质粒 |
| P0219/pGAPZC毕赤酵母质粒 |
| P0220/pGAPZαA毕赤酵母质粒 |
| P1231/pGAPZαB毕赤酵母质粒 |
| P1232/pGAPZαC毕赤酵母质粒 |
| P4527/pBGP1-Zeo毕赤酵母独立自复制质粒 |
| P0221/pPinkα-HC毕赤酵母质粒 |
| P0404/pPINK-LC毕赤酵母质粒 |
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文献和实验酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae Hansen)
酿酒酵母菌属于酵母菌科。单细胞,卵圆形或球形,具细胞壁、细胞质膜、细胞核(极微小,常不易见到)、液孢、粒线体及各种贮藏物质,如油滴、肝糖等。繁殖方式有3种:①出芽繁殖,出芽时,由母细胞生出小突起,为芽体(芽孢子),经核分裂后,一个子核移入芽体中,芽体长大后与母细胞分离,单独成为新个体。繁殖旺盛时,芽体未离开母体又生新芽,常有许多芽细胞联成一串,称为假菌丝;②孢子繁殖,在不利的环境下,细胞变成子囊,内生4个孢子,子囊破裂后,散出孢子;②接合繁殖,有时每两个子囊孢子或由它产生的两个芽体,双双
实验三十六 渗透压对微生物的影响 一、目的要求 了解渗透压对微生物的影响。 二、基本原理 若将细菌置于低渗液或水中,菌体因吸收水分膨胀甚至破裂;如果将菌体置于高渗液中,则菌体内的水分就会渗出,结果发生质壁分离现象。不同的细菌对渗透压的抵抗力不同。但不论哪种细菌,对渗透压的抵抗力是有一定限度的,超过一定限度则使菌体生长受到抑制,只有在等渗溶液中,微生物才能正常生长、繁殖,一般细菌在浓盐液
指以单细胞形态经过其大部生活史的菌类,除酵母菌类外,还包括大部分原生子囊菌类和红冬孢酵母属、白冬孢酵母属、菲利掷孢酵母等原生担子菌类的不完全世代(无孢子型、拟酵母)。无性生殖相近的霉菌易变裂殖酵母等一些可形成隔膜分裂的为例外,而大部分是依靠出芽增殖。在分类上,除这些生殖方式和形态特征以外,还需考虑各种生理学性质来确定系统。在生活史方面也各种各样,如有性世代长的易变裂殖酵母,无性世代长的酿酒酵母等。有性生殖是细胞接合,然后推行减数分裂而形成子囊孢子。通过单细胞分离以及孢子或四分孢子的分析










