- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P1828
- 2025年07月12日
8 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pCDNA3.1-GST
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pCDNA3.1-GST哺乳表达质粒
别称: pCDNA3.1-GST
质粒属性
质粒简介
pCDNA3.1-GST质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6075 bp ds-DNA circular SYN 21-JAN-2018
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6075
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 202..581
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 582..785
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 830..848
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
CDS 935..1591
/codon_start=1
/product="glutathione S-transferase from Schistosoma
japonicum"
/label=GST
/translation="MSPILGYWKIKGLVQPTRLLLEYLEEKYEEHLYERDEGDKWRNKK
FELGLEFPNLPYYIDGDVKLTQSMAIIRYIADKHNMLGGCPKERAEISMLEGAVLDIRY
GVSRIAYSKDFETLKVDFLSKLPEMLKMFEDRLCHKTYLNGDHVTHPDFMLYDALDVVL
YMDPMCLDAFPKLVCFKKRIEAIPQIDKYLKSSKYIAWPLQGWQATFGGGDHPPK"
polyA_signal 1642..1866
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 1912..2340
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2354..2683
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
CDS 2750..3544
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=Neo
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 3718..3839
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(4290..4875)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(5046..5906)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5907..6011)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag ccagtatctg ctccctgctt
61 gtgtgttgga ggtcgctgag tagtgcgcga gcaaaattta agctacaaca aggcaaggct
121 tgaccgacaa ttgcatgaag aatctgctta gggttaggcg ttttgcgctg cttcgcgatg
181 tacgggccag atatacgcgt tgacattgat tattgactag ttattaatag taatcaatta
241 cggggtcatt agttcatagc ccatatatgg agttccgcgt tacataactt acggtaaatg
301 gcccgcctgg ctgaccgccc aacgaccccc gcccattgac gtcaataatg acgtatgttc
361 ccatagtaac gccaataggg actttccatt gacgtcaatg ggtggagtat ttacggtaaa
421 ctgcccactt ggcagtacat caagtgtatc atatgccaag tacgccccct attgacgtca
481 atgacggtaa atggcccgcc tggcattatg cccagtacat gaccttatgg gactttccta
541 cttggcagta catctacgta ttagtcatcg ctattaccat ggtgatgcgg ttttggcagt
601 acatcaatgg gcgtggatag cggtttgact cacggggatt tccaagtctc caccccattg
661 acgtcaatgg gagtttgttt tggcaccaaa atcaacggga ctttccaaaa tgtcgtaaca
721 actccgcccc attgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc tatataagca
781 gagctctctg gctaactaga gaacccactg cttactggct tatcgaaatt aatacgactc
841 actataggga gacccaagct ggctagcgtt taaacttaag cttggtaccg agctcggatc
901 cactagtcca gtgtggtgga attctgcaga tatcatgtcc cctatactag gttattggaa
961 aattaagggc cttgtgcaac ccactcgact tcttttggaa tatcttgaag aaaaatatga
1021 agagcatttg tatgagcgcg atgaaggtga taaatggcga aacaaaaagt ttgaattggg
1081 tttggagttt cccaatcttc cttattatat tgatggtgat gttaaattaa cacagtctat
1141 ggccatcata cgttatatag ctgacaagca caacatgttg ggtggttgtc caaaagagcg
1201 tgcagagatt tcaatgcttg aaggagcggt tttggatatt agatacggtg tttcgagaat
1261 tgcatatagt aaagactttg aaactctcaa agttgatttt cttagcaagc tacctgaaat
1321 gctgaaaatg ttcgaagatc gtttatgtca taaaacatat ttaaatggtg atcatgtaac
1381 ccatcctgac ttcatgttgt atgacgctct tgatgttgtt ttatacatgg acccaatgtg
1441 cctggatgcg ttcccaaaat tagtttgttt taaaaaacgt attgaagcta tcccacaaat
1501 tgataagtac ttgaaatcca gcaagtatat agcatggcct ttgcagggct ggcaagccac
1561 gtttggtggt ggcgaccatc ctccaaaatg agcggccgct cgagtctaga gggcccgttt
1621 aaacccgctg atcagcctcg actgtgcctt ctagttgcca gccatctgtt gtttgcccct
1681 cccccgtgcc ttccttgacc ctggaaggtg ccactcccac tgtcctttcc taataaaatg
1741 aggaaattgc atcgcattgt ctgagtaggt gtcattctat tctggggggt ggggtggggc
1801 aggacagcaa gggggaggat tgggaagaca atagcaggca tgctggggat gcggtgggct
1861 ctatggcttc tgaggcggaa agaaccagct ggggctctag ggggtatccc cacgcgccct
1921 gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg cagcgtgacc gctacacttg
1981 ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc ctttctcgcc acgttcgccg
2041 gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg gttccgattt agtgctttac
2101 ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc acgtagtggg ccatcgccct
2161 gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt ctttaatagt ggactcttgt
2221 tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc ttttgattta taagggattt
2281 tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta acaaaaattt aacgcgaatt
2341 aattctgtgg aatgtgtgtc agttagggtg tggaaagtcc ccaggctccc cagcaggcag
2401 aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccagg tgtggaaagt ccccaggctc
2461 cccagcaggc agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag tcagcaacca tagtcccgcc
2521 cctaactccg cccatcccgc ccctaactcc gcccagttcc gcccattctc cgccccatgg
2581 ctgactaatt ttttttattt atgcagaggc cgaggccgcc tctgcctctg agctattcca
2641 gaagtagtga ggaggctttt ttggaggcct aggcttttgc aaaaagctcc cgggagcttg
2701 tatatccatt ttcggatctg atcaagagac aggatgagga tcgtttcgca tgattgaaca
2761 agatggattg cacgcaggtt ctccggccgc ttgggtggag aggctattcg gctatgactg
2821 ggcacaacag acaatcggct gctctgatgc cgccgtgttc cggctgtcag cgcaggggcg
2881 cccggttctt tttgtcaaga ccgacctgtc cggtgccctg aatgaactgc aggacgaggc
2941 agcgcggcta tcgtggctgg ccacgacggg cgttccttgc gcagctgtgc tcgacgttgt
3001 cactgaagcg ggaagggact ggctgctatt gggcgaagtg ccggggcagg atctcctgtc
3061 atctcacctt gctcctgccg agaaagtatc catcatggct gatgcaatgc ggcggctgca
3121 tacgcttgat ccggctacct gcccattcga ccaccaagcg aaacatcgca tcgagcgagc
3181 acgtactcgg atggaagccg gtcttgtcga tcaggatgat ctggacgaag agcatcaggg
3241 gctcgcgcca gccgaactgt tcgccaggct caaggcgcgc atgcccgacg gcgaggatct
3301 cgtcgtgacc catggcgatg cctgcttgcc gaatatcatg gtggaaaatg gccgcttttc
3361 tggattcatc gactgtggcc ggctgggtgt ggcggaccgc tatcaggaca tagcgttggc
3421 tacccgtgat attgctgaag agcttggcgg cgaatgggct gaccgcttcc tcgtgcttta
3481 cggtatcgcc gctcccgatt cgcagcgcat cgccttctat cgccttcttg acgagttctt
3541 ctgagcggga ctctggggtt cgaaatgacc gaccaagcga cgcccaacct gccatcacga
3601 gatttcgatt ccaccgccgc cttctatgaa aggttgggct tcggaatcgt tttccgggac
3661 gccggctgga tgatcctcca gcgcggggat ctcatgctgg agttcttcgc ccaccccaac
3721 ttgtttattg cagcttataa tggttacaaa taaagcaata gcatcacaaa tttcacaaat
3781 aaagcatttt tttcactgca ttctagttgt ggtttgtcca aactcatcaa tgtatcttat
3841 catgtctgta taccgtcgac ctctagctag agcttggcgt aatcatggtc atagctgttt
3901 cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag
3961 tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg
4021 cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg
4081 gggagaggcg gtttgcgtat tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc
4141 tcggtcgttc ggctgcggcg agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc
4201 acagaatcag gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg
4261 aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat
4321 cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag
4381 gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga
4441 tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg
4501 tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt
4561 cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac
4621 gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc
4681 ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag aacagtattt
4741 ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc
4801 ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga
4861 aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac
4921 gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc
4981 cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct
5041 gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca
5101 tccatagttg cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct
5161 ggccccagtg ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca
5221 ataaaccagc cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc
5281 atccagtcta ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta gttcgccagt taatagtttg
5341 cgcaacgttg ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac gctcgtcgtt tggtatggct
5401 tcattcagct ccggttccca acgatcaagg cgagttacat gatcccccat gttgtgcaaa
5461 aaagcggtta gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta
5521 tcactcatgg ttatggcagc actgcataat tctcttactg tcatgccatc cgtaagatgc
5581 ttttctgtga ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag aatagtgtat gcggcgaccg
5641 agttgctctt gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc cacatagcag aactttaaaa
5701 gtgctcatca ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg
5761 agatccagtt cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc
5821 accagcgttt ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg ccgcaaaaaa gggaataagg
5881 gcgacacgga aatgttgaat actcatactc ttcctttttc aatattattg aagcatttat
5941 cagggttatt gtctcatgag cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata
6001 ggggttccgc gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg tcgacggatc gggagatctc
6061 ccgatcccct atggt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pCDNA3.1-GST哺乳表达质粒
别称: pCDNA3.1-GST
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pCDNA3.1-GST质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6075 bp ds-DNA circular SYN 21-JAN-2018
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6075
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 202..581
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 582..785
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 830..848
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
CDS 935..1591
/codon_start=1
/product="glutathione S-transferase from Schistosoma
japonicum"
/label=GST
/translation="MSPILGYWKIKGLVQPTRLLLEYLEEKYEEHLYERDEGDKWRNKK
FELGLEFPNLPYYIDGDVKLTQSMAIIRYIADKHNMLGGCPKERAEISMLEGAVLDIRY
GVSRIAYSKDFETLKVDFLSKLPEMLKMFEDRLCHKTYLNGDHVTHPDFMLYDALDVVL
YMDPMCLDAFPKLVCFKKRIEAIPQIDKYLKSSKYIAWPLQGWQATFGGGDHPPK"
polyA_signal 1642..1866
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 1912..2340
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2354..2683
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
CDS 2750..3544
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=Neo
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 3718..3839
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(4290..4875)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(5046..5906)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5907..6011)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag ccagtatctg ctccctgctt
61 gtgtgttgga ggtcgctgag tagtgcgcga gcaaaattta agctacaaca aggcaaggct
121 tgaccgacaa ttgcatgaag aatctgctta gggttaggcg ttttgcgctg cttcgcgatg
181 tacgggccag atatacgcgt tgacattgat tattgactag ttattaatag taatcaatta
241 cggggtcatt agttcatagc ccatatatgg agttccgcgt tacataactt acggtaaatg
301 gcccgcctgg ctgaccgccc aacgaccccc gcccattgac gtcaataatg acgtatgttc
361 ccatagtaac gccaataggg actttccatt gacgtcaatg ggtggagtat ttacggtaaa
421 ctgcccactt ggcagtacat caagtgtatc atatgccaag tacgccccct attgacgtca
481 atgacggtaa atggcccgcc tggcattatg cccagtacat gaccttatgg gactttccta
541 cttggcagta catctacgta ttagtcatcg ctattaccat ggtgatgcgg ttttggcagt
601 acatcaatgg gcgtggatag cggtttgact cacggggatt tccaagtctc caccccattg
661 acgtcaatgg gagtttgttt tggcaccaaa atcaacggga ctttccaaaa tgtcgtaaca
721 actccgcccc attgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc tatataagca
781 gagctctctg gctaactaga gaacccactg cttactggct tatcgaaatt aatacgactc
841 actataggga gacccaagct ggctagcgtt taaacttaag cttggtaccg agctcggatc
901 cactagtcca gtgtggtgga attctgcaga tatcatgtcc cctatactag gttattggaa
961 aattaagggc cttgtgcaac ccactcgact tcttttggaa tatcttgaag aaaaatatga
1021 agagcatttg tatgagcgcg atgaaggtga taaatggcga aacaaaaagt ttgaattggg
1081 tttggagttt cccaatcttc cttattatat tgatggtgat gttaaattaa cacagtctat
1141 ggccatcata cgttatatag ctgacaagca caacatgttg ggtggttgtc caaaagagcg
1201 tgcagagatt tcaatgcttg aaggagcggt tttggatatt agatacggtg tttcgagaat
1261 tgcatatagt aaagactttg aaactctcaa agttgatttt cttagcaagc tacctgaaat
1321 gctgaaaatg ttcgaagatc gtttatgtca taaaacatat ttaaatggtg atcatgtaac
1381 ccatcctgac ttcatgttgt atgacgctct tgatgttgtt ttatacatgg acccaatgtg
1441 cctggatgcg ttcccaaaat tagtttgttt taaaaaacgt attgaagcta tcccacaaat
1501 tgataagtac ttgaaatcca gcaagtatat agcatggcct ttgcagggct ggcaagccac
1561 gtttggtggt ggcgaccatc ctccaaaatg agcggccgct cgagtctaga gggcccgttt
1621 aaacccgctg atcagcctcg actgtgcctt ctagttgcca gccatctgtt gtttgcccct
1681 cccccgtgcc ttccttgacc ctggaaggtg ccactcccac tgtcctttcc taataaaatg
1741 aggaaattgc atcgcattgt ctgagtaggt gtcattctat tctggggggt ggggtggggc
1801 aggacagcaa gggggaggat tgggaagaca atagcaggca tgctggggat gcggtgggct
1861 ctatggcttc tgaggcggaa agaaccagct ggggctctag ggggtatccc cacgcgccct
1921 gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg cagcgtgacc gctacacttg
1981 ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc ctttctcgcc acgttcgccg
2041 gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg gttccgattt agtgctttac
2101 ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc acgtagtggg ccatcgccct
2161 gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt ctttaatagt ggactcttgt
2221 tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc ttttgattta taagggattt
2281 tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta acaaaaattt aacgcgaatt
2341 aattctgtgg aatgtgtgtc agttagggtg tggaaagtcc ccaggctccc cagcaggcag
2401 aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccagg tgtggaaagt ccccaggctc
2461 cccagcaggc agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag tcagcaacca tagtcccgcc
2521 cctaactccg cccatcccgc ccctaactcc gcccagttcc gcccattctc cgccccatgg
2581 ctgactaatt ttttttattt atgcagaggc cgaggccgcc tctgcctctg agctattcca
2641 gaagtagtga ggaggctttt ttggaggcct aggcttttgc aaaaagctcc cgggagcttg
2701 tatatccatt ttcggatctg atcaagagac aggatgagga tcgtttcgca tgattgaaca
2761 agatggattg cacgcaggtt ctccggccgc ttgggtggag aggctattcg gctatgactg
2821 ggcacaacag acaatcggct gctctgatgc cgccgtgttc cggctgtcag cgcaggggcg
2881 cccggttctt tttgtcaaga ccgacctgtc cggtgccctg aatgaactgc aggacgaggc
2941 agcgcggcta tcgtggctgg ccacgacggg cgttccttgc gcagctgtgc tcgacgttgt
3001 cactgaagcg ggaagggact ggctgctatt gggcgaagtg ccggggcagg atctcctgtc
3061 atctcacctt gctcctgccg agaaagtatc catcatggct gatgcaatgc ggcggctgca
3121 tacgcttgat ccggctacct gcccattcga ccaccaagcg aaacatcgca tcgagcgagc
3181 acgtactcgg atggaagccg gtcttgtcga tcaggatgat ctggacgaag agcatcaggg
3241 gctcgcgcca gccgaactgt tcgccaggct caaggcgcgc atgcccgacg gcgaggatct
3301 cgtcgtgacc catggcgatg cctgcttgcc gaatatcatg gtggaaaatg gccgcttttc
3361 tggattcatc gactgtggcc ggctgggtgt ggcggaccgc tatcaggaca tagcgttggc
3421 tacccgtgat attgctgaag agcttggcgg cgaatgggct gaccgcttcc tcgtgcttta
3481 cggtatcgcc gctcccgatt cgcagcgcat cgccttctat cgccttcttg acgagttctt
3541 ctgagcggga ctctggggtt cgaaatgacc gaccaagcga cgcccaacct gccatcacga
3601 gatttcgatt ccaccgccgc cttctatgaa aggttgggct tcggaatcgt tttccgggac
3661 gccggctgga tgatcctcca gcgcggggat ctcatgctgg agttcttcgc ccaccccaac
3721 ttgtttattg cagcttataa tggttacaaa taaagcaata gcatcacaaa tttcacaaat
3781 aaagcatttt tttcactgca ttctagttgt ggtttgtcca aactcatcaa tgtatcttat
3841 catgtctgta taccgtcgac ctctagctag agcttggcgt aatcatggtc atagctgttt
3901 cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag
3961 tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg
4021 cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg
4081 gggagaggcg gtttgcgtat tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc
4141 tcggtcgttc ggctgcggcg agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc
4201 acagaatcag gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg
4261 aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat
4321 cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag
4381 gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga
4441 tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg
4501 tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt
4561 cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac
4621 gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc
4681 ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag aacagtattt
4741 ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc
4801 ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga
4861 aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac
4921 gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc
4981 cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct
5041 gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca
5101 tccatagttg cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct
5161 ggccccagtg ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca
5221 ataaaccagc cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc
5281 atccagtcta ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta gttcgccagt taatagtttg
5341 cgcaacgttg ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac gctcgtcgtt tggtatggct
5401 tcattcagct ccggttccca acgatcaagg cgagttacat gatcccccat gttgtgcaaa
5461 aaagcggtta gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta
5521 tcactcatgg ttatggcagc actgcataat tctcttactg tcatgccatc cgtaagatgc
5581 ttttctgtga ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag aatagtgtat gcggcgaccg
5641 agttgctctt gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc cacatagcag aactttaaaa
5701 gtgctcatca ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg
5761 agatccagtt cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc
5821 accagcgttt ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg ccgcaaaaaa gggaataagg
5881 gcgacacgga aatgttgaat actcatactc ttcctttttc aatattattg aagcatttat
5941 cagggttatt gtctcatgag cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata
6001 ggggttccgc gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg tcgacggatc gggagatctc
6061 ccgatcccct atggt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1963/pENTR223-CSRP3人源基因质粒 |
| P1964/pENTR223-RPS4X人源基因质粒 |
| P1965/pENTR223-DENR人源基因质粒 |
| P1966/pENTR223-C1orf158人源基因质粒 |
| P1967/pENTR223-RAB39B人源基因质粒 |
| P1968/pENTR223-RGS2人源基因质粒 |
| P1969/pENTR223-LYPD4人源基因质粒 |
| P1970/pENTR223-TESC人源基因质粒 |
| P1971/pENTR223-ABHD14B-A17T人源基因质粒 |
| P1972/pENTR223-SENP8人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
【求助】逆转录病毒、慢病毒载体与其他真核表达载体在稳定筛选时的区别？
.1等一些真核表达载体就行了还是选择慢病毒载体更好？ freecell 1. 在慢病毒载体中，由哺乳动物细胞翻译后的再加工修饰产生的外源蛋白，在活性方面远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统，表达的外源蛋白更加的接近天然蛋白。 2. 真核表达质粒的转染对于分裂增殖比较旺盛的体外培养细胞转染效果较好，但表达的目的基因常常随时间的延长而发生丢失。与真核表达质粒相比，病毒载体介导的基因转移可以整合入宿主的基因组中，具有更好的稳定性。最初研究的鼠干细胞
pCDNA3.1-GST哺乳表达质粒
￥100 - 1000
