- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P2291
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#65487
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pC-sleeping beauty昆虫睡美人质粒
别称: Plasmid#65487
| 别称: | Plasmid#65487 |
|---|---|
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 昆虫细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 基因敲除 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pC-sleeping beauty质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3927/pCMV-SPORT6-TADA3人源基因质粒 |
| P3928/pCMV-SPORT6-PTS人源基因质粒 |
| P3929/pCMV-SPORT6-MYD88人源基因质粒 |
| P3930/pCMV-SPORT6-LMF1人源基因质粒 |
| P3931/pCMV-SPORT6-DLX4人源基因质粒 |
| P3932/pCMV-SPORT6-RAB35人源基因质粒 |
| P3933/pCMV-SPORT6-ELK1人源基因质粒 |
| P3934/pCMV-SPORT6-MEF2A(1同义突变）人源基因质粒 |
| P3935/pCMV-SPORT6-CANT1人源基因质粒 |
| P3936/pCMV-SPORT6-ZFP36人源基因质粒 |
| P3937/pCMV-SPORT6-PPM1M人源基因质粒 |
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文献和实验休眠芽 statoblast， sleeping bud （ 1）为淡水苔藓虫、无性繁殖的一种特殊构造。直径在 1毫米以下，呈圆盘形，椭圆板形．方板形或鞍形，外表包着几丁质，内部是细胞团块。秋末或热带的旱季开始，在母虫体内的胃端大量形成．冬季或旱季母虫破裂后出来，到外部环境中。固着性的休眠芽附着于母虫所附着的水草或岩石上，浮游性的休眠芽，则依其气室的浮力而漂浮于水面上，同时因有坚固的外壳．所以耐冰冻、耐干燥．到了翌春或雨季，其内部的细胞块脱出而形成新个体。休眠芽是有利于越冬
丁香园myl0605的观点：前几天为自己养的PC12是未分化还是分化型困扰,查了一些资料,现发上来希望能给有同样问题的战友有一点帮助!培养条件:ＰＣ12细胞培养于铺有鼠尾胶原的玻璃培养瓶中,置于ＣＯ2培养箱(37℃,95%空气5%ＣＯ2),培养基选用ＤＭＥＭ(ｐＨ7.4,高糖),加入10%灭活小牛血清及5%灭活马血清。分化前:ＰＣ12细胞在培养基中多呈圆形,直径15～20μｍ,也有椭圆或多角形的,扁平的细胞少见,倾向于聚集成小团簇状(A图)。分化后:加入ＮＧＦ后的24ｈ内细胞停止分裂,长出似
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