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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
80
- 英文名:
pET32a-MS2(phage)
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
质粒干粉
英文名称:pET32a-MS2(phage)
形式:质粒干粉
参考用途:载体宿主:大肠杆菌,载体用途:蛋白表达,基因种属:噬菌体,基因类型:ORF,原核抗性:Amp,荧光蛋白:未知。
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,1797bp)
存储条件:2-8℃
安全等级:0
操作步骤:
1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800µl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 µl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
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文献和实验载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一、一个合格质粒的组成要素 复制起始位点Ori,即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 抗生素抗性基因:可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 多l克隆位点:MCS克隆携带外源基因片段 P/E:启动子/增强子
一、质粒绝大多数的生物都是以DNA 的形式来储藏其遗传信息。遗传物质要能生生不息地传给后代的首要条件就是它至少要具有一个复制原(ori, origin of replication,或译为复制起点),使整个基因体得以复制。含有复制原的遗传物质称为replicon,我们姑且把它译为为复制体吧!原核性复制体分为原核染色体、质粒(plasmids)和噬菌体基因体(phage genome)等三类。其中质粒的基因体和原核染色体类似,是由双绞炼DNA 构成,并以超卷曲的形式存在。它们的基因体约
一、质粒 绝大多数的生物都是以DNA的形式来储藏其遗传信息。遗传物质要能生生不息地传给后代的首要条件就是它至少要具有一个复制原(ori, origin of replication,或译为复制起点),使整个基因体得以复制。含有复制原的遗传物质称为replicon,我们姑且把它译为为复制体吧!。原核性复制体分为原核染色体、质粒(plasmids)和噬菌体基因体(phage genome)等三类。其中质粒的基因体和原核染色体类似,是由双绞炼DNA构成,并以超卷曲的形式存在。它们的基因体约
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