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- Xybio
- 上海
- P1434
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pBT3-N
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pBT3-C膜蛋白双杂交质粒
别称: pBT3-N
| 启动子: | CYC1 |
|---|---|
| 复制子: | pBS |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | LEU2 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 酵母菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 杂交 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Kan |
| 筛选标记： | LEU2 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pBT3-N是一个膜蛋白酵母双杂交质粒。
质粒图谱
质粒序列
ORIGIN
1 tagtacgacg atcttcttag gggcagacat tagaatggta tatccttgaa atatatatat
61 atatattgct gaaatgtaaa aggtaagaaa agttagaaag taagacgatt gctaaccacc
121 tattggaaaa aacaataggt ccttaaataa tattgtcaac ttcaagtatt gtgatgcaag
181 catttagtca tgaacgcttc tctattctat atgaaaagcc ggttccggcg ctctcacctt
241 tcctttttct cccaattttt cagttgaaaa aggtatatgc gtcaggcgac ctctgaaatt
301 aacaaaaaat ttccagtcat cgaatttgat tctgtgcgat agcgcccctg tgtgttctcg
361 ttatgttgag gaaaaaaata atggttgcta agagattcga actcttgcat cttacgatac
421 ctgagtattc ccacagttaa ctgcggtcaa gatatttctt gaatcaggcg ccttagaccg
481 ctcggccaaa caaccaatta cttgttgaga aatagagtat aattatccta taaatataac
541 gtttttgaac acacatgaac aaggaagtac aggacaattg attttgaaga gaatgtggat
601 tttgatgtaa ttgttgggat tccattttta ataaggcaat aatattaggt atgtagatat
661 actagaagtt ctcctcgacc ggtcgatatg cggtgtgaaa taccgcacag atgcgtaagg
721 agaaaatacc gcatcaggaa attgtaagcg ttaatatttt gttaaaattc gcgttaaatt
781 tttgttaaat cagctcattt tttaaccaat aggccgaaat cggcaaaatc ccttataaat
841 caaaagaata gaccgagata gggttgagtg ttgttccagt ttggaacaag agtccactat
901 taaagaacgt ggactccaac gtcaaagggc gaaaaaccgt ctatcagggc gatggcccac
961 tacgtgaacc atcaccctaa tcaagttttt tggggtcgag gtgccgtaaa gcactaaatc
1021 ggaaccctaa agggagcccc cgatttagag cttgacgggg aaagccggcg aacgtggcga
1081 gaaaggaagg gaagaaagcg aaaggagcgg gcgctagggc gctggcaggt gtagcggtca
1141 cgctgcgcgt aaccaccaca cccgccgcgc ttaatgcgcc gctacagggc gcgtccattc
1201 gccattcagg ctgcgcaact gttgggaagg gcgatcggtg cgggcctctt cgctattacg
1261 ccagctggcg aaagggggat gtgctgcaag gcgattaagt tgggtaacgc cagggttttc
1321 ccagtcacga cgttgtaaaa cgacggccag tgagcgcgcg taatacgact cactataggg
1381 cgaattgggt accggccgca aattaaagcc ttcgagcgtc ccaaaacctt ctcaagcaag
1441 gttttcagta taatgttaca tgcgtacacg cgtctgtaca gaaaaaaaag aaaaatttga
1501 aatataaata acgttcttaa tactaacata actataaaaa aataaatagg gacctagacc
1561 ttcaggttgt ctaactcctt ccttttcggt tagagcggag ggtggggggg aggggcgtgt
1621 atgtaagcgt gacataacta attacatgac ctattaagat ctgacgtcag cgctccgcgg
1681 ttagctactt accatggggg ccaaagcggc cttaattaaa ggcctggccg taatggccct
1741 gcaggaattc aaaatcaagc ttatcgaacc ggcc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2869/pENTR223-MITF-T1234G人源基因质粒 |
| P2870/pENTR223-UBAC1人源基因质粒 |
| P2871/pENTR223-SERBP1-C1108T人源基因质粒 |
| P2872/pENTR223-DCTN2人源基因质粒 |
| P2873/pENTR223-NOL4（343-1611bp）人源基因质粒 |
| P2888/pENTR223-GOT2-T1283C人源基因质粒 |
| P2889/pENTR223-UGCG-G1167T（2同义突变）人源基因质粒 |
| P2890/pENTR223-RMDN2（56-1233bp）人源基因质粒 |
| P2891/pENTR223-RCOR3-A299G人源基因质粒 |
| P2892/pENTR223-BBOX1（2同义突变）人源基因质粒 |
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文献和实验分裂泛素化膜酵母双杂交（MYTH）系统：鉴别蛋白质相互作用的有力工具
完整膜蛋白在基本生物学和临床上的重要性，使得高通量鉴别全长跨膜蛋白质相互作用的酵母双杂交系统得以快速发展，因此我们实验室发提出了分裂泛素化膜酵母双杂交（MYTH）系统。0:00 分裂泛素化膜酵母双杂交（MYTH）系统：鉴别蛋白质相互作用的有力工具 0:21 内容订阅 1:22 内容简介 1:41 选择诱饵和适合的MYTH系统 3:04 用缺口修复生成tMYTH诱饵 3:07 a.制备载体、扩增目的基因 5:30 b.转化酵母、提取诱饵质粒DNA 7:03 确认诱饵 8:10
）时。这有助于研究低丰度蛋白质和优化难以表达的蛋白质项目。它也是一个很好的纯化标签。FLAG 序列还含有肠激酶切割位点，如果标签位于 N 端，切除后不留多余的残基。谷胱甘肽 S - 转移酶（GST）GST 是最早被使用的表位标签之一；它可以置于 N 或 C 端并可以蛋白质的可溶表达。用谷胱甘肽结合树脂进行纯化。绿色荧光蛋白（GFP）在表位标签中独一无二，GFP 是一种自发荧光的 27 kDa 标签，可通过荧光显微镜直接在活细胞中检测到。血凝素 A（HA）HA 来自流感血凝素蛋白的结合结构域，含有高
测磷酸化水平 mengcb 还可以用PKC的 报告质粒检测FRET变化啊，也很经典的 bianbenjamin 放射性受体配体结合试验也是一个非常灵敏的测定PKC转位的方法，只是需要同位素标记的佛波酯，还是买的到的。我有这样一篇文献，需要的话上传给你。不过还是没有解决你的问题，你问的的确很深了，我也非常感兴趣这个问题，期待高人回答。 zhidanguilai 加拿大Immunechem公司的非放射性蛋白激酶C活性
